实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
小鼠卵泡膜细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、管和神经。哺乳动物的卵巢内卵泡的发育需要相关的调节才能完成，垂体（卵泡刺和黄体**素）使原始卵泡开始发育，其过程中还产生大量的雌。雌是卵巢的颗粒细胞和卵泡膜细胞在垂体的作用下协同合成的，卵泡膜细胞合成的雄透过基膜进入颗粒细胞，并转变为雌。因此，卵泡膜细胞在生殖调节中占有关键的位置，了解其在病理及生理中的作用，对于与性有关的妇产科（如多囊卵巢综合症、卵巢癌等）的研究有着重要意义。在哺乳动物卵泡生长发育的过程中，卵母细胞由不断增加的颗粒细胞层包裹。卵巢组织中的膜细胞作为卵泡的外层细胞可以维持卵泡结构的完整性，参与构成卵母细胞和颗粒细胞发育的微环境且为类固醇的**提供底物。在哺乳动物中调节膜细胞类固醇**的机制已见相关报道，但是有关卵泡膜细胞的聚集、生长和分化的研究尚不深入。
组织来源
产品规格
货号
用途
卵巢组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1884
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的小鼠卵泡膜细胞采用先机械分离后胶原酶消化结合Percoll密度梯度离心法、并通过培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠卵泡膜细胞经3β-HSD荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)elisa检测试剂盒免费代测
通用型羊弓形体刚地弓形虫（Toxotest；Toxoplasma gondii）基因检测试剂盒
小鼠D-乳酸elisa分析检测���剂盒
大鼠血管紧张素转化酶(ACE)elisa检测试剂盒
石蜡切片组织BAX蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)elisa检测试剂盒
大鼠羟化酶(TH)elisa检测试剂盒
体液乙酰酯酶活性荧光法定量检测试剂盒
石斑鱼卵黄蛋白原(VTG)elisa检测试剂盒免费代测
源结构域转录因子HESX1抗体 HESX1
唾液酸结合性球蛋白样凝集素11抗体 SIGLEC11
RNA结合蛋白35A抗体 RBM35A/ESRP1
Schlafen 8蛋白抗体 Schlafen 8
6号染色体开放阅读框93抗体 LTV1/C6orf93
ADAM17重组兔单克隆抗体 ADAM17 (9E7)
甲状旁腺相关受体蛋白2抗体 PTH2R
碱性磷酸酶(肠型)抗体 ALPI
胰羧肽酶A1抗体 CPA1
抑癌蛋白AIMP3抗体 EEF1E1
多腺苷二磷酸多聚酶PARP9抗体 PARP9
泛素羧基末端水解酶2单克隆抗体 USP2
GALNT2蛋白抗体 GALNT2
G蛋白结合蛋白RAB6A抗体 RAB6A
莫洛尼白血病病毒10样蛋白1抗体 MOV10L1
尿黑酸氧化酶抗体 HGD
猪前列腺素E2(PGE2)elisa检测试剂盒
小鼠卵泡膜细胞大鼠粒细胞趋化蛋白2(GCP2)elisa检测试剂盒
组织长链羟脂酰脱氢酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量检测试剂盒
Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3; ErbB-3; c erbB 3; c-erbB3; ErbB 3; cerbB3; ERBB3 protein; cerbB; 3erbB3 S; Glial growth factor receptor; HER 3; HER3; LCCS2; MDA BF 1; MGC88033; p180 ErbB3; p45 sErbB3; p85 sErbB3; proto-oncogene-; receptor tyrosine protein kinase ERB3 [precursor]; Receptor tyrosine protein kinase erbB 3; Receptor tyrosine protein kinase erbB3; Tyrosine kinase type cell surface receptor HER3; V erb b2 avian erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 3; v erb b2 erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 3 (avian); v erb b2 erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 3; ERBB3_HUMAN.
小鼠脉络膜微血管内皮细胞
兔神经胶质细胞
OP9小鼠骨髓基质细胞
HUVEC人脐静脉内皮细胞（原代细胞永生化）
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；