实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
小鼠气管上皮细胞分离自气管组织；气管（Trachea），呼吸器官的一部分；为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘，与环状软骨相连；向下至第四、五胸椎体（相当胸骨角平面）交界处，分左、右主支气管，分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成，有弹性，软骨为“C”字形的软骨环，缺口向后，各软骨环以韧带连接起来，环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接，保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜，表面覆盖纤毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒，纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出，以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的道防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，因此，在基础及临床研究中极为重要。
组织来源
产品规格
货号
用途
气管
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1765
仅供科研研究实验
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的小鼠气管上皮细胞采用-中性蛋白酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠气管上皮细胞经PCK荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
通用型鸡鼠伤（ST）基因检测试剂盒
组织AX1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
人抵抗素(Resistin)elisa分析检测试剂盒
大鼠复制蛋白A 70kDaDNA结合亚基(RPA1)elisa检测试剂盒
乙醛脱氢酶（ALDH）试剂盒
小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)elisa检测试剂盒
大鼠脑红蛋白(NGB)elisa检测试剂盒
大量蓝藻菌基因组DNA氯化铯萃取试剂盒
兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)elisa分析检测试剂盒
乳糖酶根皮苷水解酶1抗体 LCT
上皮细胞癌转化蛋白2抗体 ECT2
LYSMD4蛋白抗体 LYSMD4
MRVI1蛋白抗体 MRVI1
肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白1抗体 TRAF3IP1
轴索过度生长抑制因子B抗体 Nogo B
睾丸特异蛋白酶样蛋白50抗体 TSP50
骨形态发生蛋白15抗体 BMP15
线粒体核糖体蛋白S24抗体 MRPS24
小脑变性相关蛋白2抗体 CDR2
巴豆酰组蛋白H2B重组兔单克隆抗体 Histone H2B (Crotonyl-Lys15 / Lys16 / Lys20)
白血病抑制因子抗体 LIF
CD27重组兔单克隆抗体 CD27
COPT2抗体 COPT2
磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体 phospho-Kidins220 (Ser918)
磷酸化蛋白激酶9抗体 phospho-PTK9 (Tyr321)
小鼠可溶性E选择素(sE-selectin)elisa检测试剂盒
小鼠气管上皮细胞大鼠S100蛋白(S-100)elisa检测试剂盒
透射电镜（TEM）制片处理包埋液
Alpha L iduronate sulfate sulfatase; Alpha-L-iduronate sulfate sulfatase; AW214631; Ids; IDS_HUMAN; Iduronate 2 sulfatase 14 kDa chain; Iduronate 2 sulfatase 42 kDa chain; Iduronate 2 sulfatase; Iduronate 2-sulfatase 14 kDa chain; Iduronate sulfatase; Idursulfase; MPS2; RP23-29M4.1; SIDS.
小鼠前列腺成纤维细胞
兔前脂肪细胞
RM-1小鼠前列腺癌细胞
Ishikawa人内膜腺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；