实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
小鼠三叉神经星形胶质细胞分离自三叉神经组织;三叉神经为粗大的混合性脑神经,含一般躯体感觉和特殊内脏运动两种纤维。其特殊内脏运动纤维起于脑桥中段的三叉神经运动核,纤维组成三叉神经运动根,由脑桥基底部与脑桥臂交界处出脑,位于感觉根下内侧,后进入三叉神经第3支下颌神经中,经卵圆孔出颅,随下颌神经分支分布于咀嚼肌等。运动根内还含有三叉神经中脑核有关的纤维,主要传导咀嚼肌的本体感觉。三叉神经内以躯体感觉神经纤维为主,这些纤维的细胞体位于三叉神经节(半月节)内,该神经节位于颅中窝颧骨岩部的前面三叉神经压迹处,为硬脑膜形成的美克尔腔包裹。神经胶质细胞是神经组织中除神经元以外的另一大类细胞,也有突起,但无树突和轴突之分,广泛分布于和周围神经系统。在哺乳类动物中,神经胶质细胞与神经元的细胞数量比例约为10:1。在神经系统(CNS)中的神经胶质细胞主要有星形胶质细胞、少突胶质细胞(与前者合称为大胶质细胞)和小胶质细胞等。传统认为胶质细胞属于结缔组织,其作用仅是连接和支持各种神经成分,其实神经胶质还起着分配营养物质、参与修复和吞噬的作用,在形态、化学特征和胚胎起源上都不同于普通结缔组织。星形胶质前体细胞主要表达Vimentin,而成熟之后表达Vimentin和胶质纤维酸性蛋白(GFAP),故GFAP被认为是星形胶质细胞成熟的标志物。
组织来源
产品规格
货号
用途
脑组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1961
仅供科研研究实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传2-3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的小鼠三叉神经星形胶质细胞采用胰蛋白酶消化法结合差速贴壁法筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠三叉神经星形胶质细胞经GFAP荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
HOECHST33342/PI简易细胞核形态染色试剂盒
小鼠丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基1(SPTLC1)elisa检测试剂盒
大鼠胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)elisa检测试剂盒
组织肌酸激酶工酶混合型(CK-MB)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒
人杆状病毒IAP重复包含蛋白2/3(BIRC2/3)elisa分析检测试剂盒
小鼠硬骨素(SOST)elisa检测试剂盒
大鼠球蛋白A(IgA)elisa检测试剂盒免费代测
3-OMD高效液相色谱电化学定量检测试剂盒
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒
烯酰辅酶A水合酶含结构域蛋白2抗体 ECHDC2
细胞角蛋白1重组兔单克隆抗体 Cytokeratin 1
TATA框结合蛋白关联因子12抗体 TAF12
T细胞激活蛋白抗体 Ly6a
AF750标记的G蛋白偶联受体14抗体 GPR14, Alexa Fluor 750 conjugated
APC-Cy7标记人CD117 (c-kit)单克隆抗体 human CD117 (c-kit)/APC-Cy7
精子发生相关蛋白21抗体 SPATA21
卷曲螺旋结构域蛋白7抗体 CCDC7
运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗体 Gemin 2
着丝粒蛋白I抗体 CENPI
富含GC启动子结合蛋白1/血管壁相连蛋白抗体 GPBP1
钙激活氯通道调节蛋白4抗体 CLCA4
HCG3蛋白抗体 HCG3
IQCC蛋白抗体 IQCC
配对盒基因5抗体 PAX5
染色体分离调节蛋白1抗体 FAM64A
人CD5分子(CD5)elisa检测试剂盒
小鼠三叉神经星形胶质细胞细胞一氧化氮(NO)活性比色法定量检测试剂盒
小鼠骨特性碱性磷酸酶(BALP)elisa检测试剂盒
Complement C1q subcomponent subunit A; C1Q; C1QA_HUMAN; Complement C1q subcomponent subunit A; C1QA; C1QA_HUMAN;
小鼠三叉神经元细胞
兔脐带间充质干细胞
小鼠白血病细胞;L6565
JHH-5人肝细胞癌
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;