实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
小鼠肾动脉平滑肌细胞分离自肾动脉组织；肾动脉的分支为叶间动脉，穿行于肾柱内，上行至皮质与髓质交界处，形成与肾表面平行的弓状动脉。小叶间动脉向被膜发出，并向周围的肾小体发出入球小动脉，进入肾小囊后形成球形的网，再汇集成出球小动脉，出肾小体。直小动脉分支形成网，再汇合成直小静脉，入弓状静脉、叶间静脉，后汇合成肾静脉经肾门出肾，注入下腔静脉。肾动脉既是肾的营养血管，又是肾的机能血管，与肾泌尿机能密切相关。肾动脉在肾实质内形成两个网：肾小球网，血压较高，利于血浆滤过形成原尿；球后网，血压较低，利于肾小管的重吸收。肾动脉平滑肌细胞是肾动脉的重要结构细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肾动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
组织来源
产品规格
货号
用途
肾动脉组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1796
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的小鼠肾动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠肾动脉平滑肌细胞经α-SMA荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
人单纯疱疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒
雌二醇(E2)elisa分析检测试剂盒
石蜡切片组织化学HRP酶联DAB间接检测试剂盒（含HRP二抗）
小鼠大内皮素(Big ET)elisa分析检测试剂盒
大鼠I型前胶原羧基端肽（PICP）elisa检测试剂盒
羊胰岛素样生长因子II(IGF2)elisa检测试剂盒
大鼠热休克蛋白90-alpha(Hsp90aa1/Hsp86/Hspca)elisa检测试剂盒免费代测
细胞HPV6（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6）病毒定性检测试剂盒
豚鼠白三烯B4(LTB4)elisa分析检测试剂盒
1号染色体开放阅读框189抗体 C1orf189
2号染色体开放阅读框42抗体 C2orf42
肌动蛋白结合蛋白LIM3抗体 ABLIM3
鸡新城疫疫苗（鸡瘟4型混合病毒）抗体 Newcastle disease virus
PE标记小鼠CD45.2单克隆抗体 mouse CD45.2/PE
Rabbit Anti-Acetyl-Histone H4 (Lys8) antibody
双特异性磷酸酶抗体28抗体 DUSP28
丝氨酸蛋白酶8抗体 PRSS8
F-box蛋白相关蛋白11抗体 FBXO11
FITC标记人CD79b单克隆抗体 human CD79b/FITC
磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5G抗体 Synaptojanin
卵泡刺结合蛋白2抗体 FNIP2
蛋白磷酸酶1调节亚单位18抗体 Phostensin
电压门控钾通道Kv4.1抗体 KCND1
锌指蛋白ZZEF1抗体 ZZEF1
血管**素-1抗体 Angiopoietin-1
高效CHIP DNA分子库构建试剂盒
小鼠肾动脉平滑肌细胞小鼠CD19分子(CD19)elisa分析检测试剂盒
大鼠纤维蛋白原γ链(Fgg)elisa检测试剂盒
SPINLW1; WAP7; WFDC7; Variant; Cancer/testis antigen 71; CT71; Epididymal protease inhibitor; Protease inhibitor WAP7; Serine protease inhibitor-like with Kunitz and WAP domains 1; EPPI_MOUSE; WAPfour-disulfide core domain protein 7.
小鼠肾上腺皮质细胞
兔皮下微血管内皮细胞
9L/lacZ大鼠胶质肉瘤细胞
K1(GLAG-66)人甲状腺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；