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产品资料

小鼠食管成纤维细胞

小鼠食管成纤维细胞
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  • 产品名称:小鼠食管成纤维细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
小鼠食管成纤维细胞公司正在出售的产品:Panc 03.27人胰腺癌细胞 染色体及有丝分裂蛋白MIS12抗体 LEP ELISA Kit 瘦素检测试剂盒 凝血酶(凝血因子II)激活肽2抗体 VA-ES-BJ人上皮样肉瘤细胞
产品描述
小鼠食管成纤维细胞

细胞简介:


小鼠食管成纤维细胞分离自食管组织;食管是咽和胃之间的消化管,食管在系统发生上起初很短,随着颈部的伸长和心肺的下降,而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之间的纵膈内,胸段通过膈孔与腹腔内腹相连,腹段很短与胃相连。在发育过程中,食管的上皮细胞增殖,由单层变为复层,食管使管腔变狭窄,甚至一度闭锁,以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层:黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中,黏膜层,包括上皮、固有层和黏膜肌层。食管的外膜,由疏松结缔组织构成,富有血管、管及神经。主要包含食管成纤维细胞,成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

组织来源

产品规格

货号

用途

食管

5×105cells/T25细胞培养瓶

A01X1801

仅供科研研究实验

培养信息:

培养基:基础培养基,含FBSbFGFInsulinPenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:成纤维细胞样

传代特性:可传2-3代左右

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%CO25%

小鼠食管成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

方法简介

实验室分离的小鼠食管成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测

实验室分离的小鼠食管成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、、酵母和等。

实验具体步骤:


(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净;
(3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中;
(4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,

利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)

(6)种植组织块:将上述组织使用2X双抗冰冷PBS洗涤3次,每次5min,然后使用完全培养基(含有1X双抗)洗涤一次。经过的心脏破碎组织块经过离心后,可以用细头

镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的
盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);


(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;

(8)贴壁细胞传代:当单个细胞从组织块爬出面积在组织块3-5倍,进行传代,此时可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化组织块爬出的细胞,消化时间根据正常细胞消化时间即可,当然可以在消化过程中不断管擦爬出细胞的皱缩情况,一旦达到消化完成(皱缩细胞≥70%)即可使用完全培养基终止消化。在吹打单个细胞时候,一定要轻柔/缓慢,不能吹打到组织块,如果组织块掉下来,大概率是不会再贴壁成功啦。

根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;

(9)鉴定:细胞在传代至代、第五代、第十代时候可以将部分细胞进行鉴定,鉴定办法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式细胞术等。

实验方法:

一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。
二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。

公司正在出售的产品:


MouseGelsolinELISAKit

大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa分析检测试剂盒

β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit

人核糖核酸酶,核糖核酸酶A家族,(肝脏,嗜酸性粒细胞源性神经)(RNASE2)elisa分析检测试剂盒

HumanRNASE2ELISAkit

猪皮质醇(Cortisol)elisa检测试剂盒

大鼠神经型一氧化氮合成酶(nNOS/NOS1)elisa检测试剂盒

线虫β-半乳糖苷酶化学发光定量检测试剂盒

豚鼠血管**素2(ANGPT2)elisa检测试剂盒

鸭子刺鼠相关蛋白(AGRP)elisa分析检测试剂盒

AGRP ELISA Kit

人瘢痕性天疱疮抗体(CP)elisa分析检测试剂盒

CPELISAKit

体液肌酐(CREATININE)酶连续反应比色法定量检测试剂盒

G蛋白偶联受体109A(GPR109A)elisa分析检测试剂盒

大鼠Toll样受体4(TLR4)elisa分析检测试剂盒

小鼠融合蛋白(FUS)elisa检测试剂盒

背板胶质乙酰酯酶抗体

NOTUM

通用转录因子3A

GTF3A

tRNA剪接内切酶2抗体  Anti-TSEN2

凋亡相关蛋白4抗体  Anti-PDCD4

磷酸化蛋白激酶C抗体  Anti-phospho-PRKCA(Thr637)

细胞外基质底物反应蛋白2抗体  Anti-SPON2/M spondin/Mindin

Cy5.5标记的鼠抗人IgG H&L单克隆抗体

小鼠食管成纤维细胞Mouse Anti-Human IgG H&L (3D3) mAb / Cy5.5

范可尼贫血相关蛋白E抗体

Arhgap20; KIAA1391; RARHOGAP; RHG20_HUMAN; Rho GTPase activating protein 20; Rho GTPase-activating protein 20; Rho type GTPase activating protein 20; Rho-type GTPase-activating protein 20.

小鼠食管平滑肌细胞

兔膀胱间质细胞

C6大鼠脑胶质瘤细胞

K7M2WT(K7M2-WT)-LUC小鼠骨肉瘤成骨细胞荧光素酶标记


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