实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
小鼠小肠黏膜上皮细胞分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜反应的发生、性质和强度。
组织来源
产品规格
货号
用途
小肠组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1805
仅供科研研究实验
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的小鼠小肠黏膜上皮细胞采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠小肠黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
小鼠氧化型低密度脂蛋白（OxLDL）elisa检测试剂盒
钾离子通道蛋白家族成员2抗体
KCNE2
细胞分裂周期蛋白23重组兔单克隆抗体
Cdc23
血液组织纤维型蛋白溶酶原激活剂（tPA）活性化学发光法定量检测试剂盒
大鼠松弛肽/松弛素1(RLN1)elisa检测试剂盒免费代测
埃蒙氏（EMMONS）培养基
细胞活性检测试剂盒-绿色荧光500T
myc蛋白抗体
Myc
FAM73A蛋白抗体
FAM73A
TSK蛋白抗体 Anti-TSK/Tsukushin/LRRC54
视网膜母细胞瘤样蛋白2抗体 Anti-RBR2/Rb2 p130
钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白抗体 Anti-NTCP/SLC10A1
性结合球蛋白抗体 Anti-SHBG
着丝粒ZWILCH蛋白抗体
ZWILCH
神经紧张素抗体
Neurotensin
磷酸化细胞信号转导分子Smad-1/5抗体 Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)
磷酸化谷氨酸受体2A抗体 Anti-Phospho-NMDAR2A (Tyr1325)
视网膜母细胞瘤结合蛋白P48抗体 Anti-RbAp48
肿瘤坏死因子受体相关蛋白4抗体 Anti-TRAF4/CART 1
大鼠抵抗素样α(Retnla)elisa分析检测试剂盒
小鼠小肠黏膜上皮细胞Retnla ELISA kit
山羊白介素6(IL-6)elisa分析检测试剂盒
26S proteasome non ATPase regulatory subunit 7; 26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 7; 26S proteasome regulatory subunit rpn8; 26S proteasome regulatory subunit S12; Moloney leukemia virus 34 proviral integration; MOV 34; MOV 34L; MOV34; Mov34 homolog; Mov34 protein homolog; MOV34L; P40 antibody Proteasome (prosome macropain) 26S subunit non ATPase 7; Proteasome 26S non ATPase subunit 7; Proteasome 26S S12; Proteasome subunit p40; PSD7_HUMAN; PSMD 7; PSMD-7; PSMD7; S12 antibody.
小鼠小肠平滑肌细胞
兔毛囊干细胞
NRK-49F正常大鼠肾细胞
KMS-11人多发性骨髓瘤细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；