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产品资料

小鼠真皮毛细胞

小鼠真皮毛细胞
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  • 产品名称:小鼠真皮毛细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
小鼠真皮毛细胞公司正在出售的产品:PF-382人白血病细胞 3号染色体开放阅读框24抗体 RF ELISA Kit 类风湿因子检测试剂盒 17号染色体开放阅读框78抗体 TUHR4TKB人肾癌细胞
产品描述
小鼠真皮毛细胞

产品名称

小鼠真皮毛细胞

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

组织来源

皮肤组织

生长特性

贴壁

细胞形态

梭形、多角形

分类

小鼠原代细胞

货号

A01X1906

用途

仅供科研实验

培养信息:


包被条件 PLL0.1mg/ml

培养基 含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 每2-3天换液一次;

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传1-2

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相:空气,95%CO25%

细胞简介:

小鼠真皮毛细胞分离自皮肤毛囊组织;毛囊是表皮细胞连续形成的袋样上皮。其基底是真皮凹进的真皮毛,中心是一根毛发,立毛肌的一侧斜附在毛囊壁上,附着点的上方为皮脂腺通入毛囊的短颈,毛囊在皮肤表面的开口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下组织中,毛囊向下伸入真皮约有一厘米深度,它是由包绕毛发与表皮相连的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所组成的一个结构比较复杂的器官附件组织。毛囊实际上是由结缔组织和上皮两部分所组成,除了具有结缔组织和血管的真皮(毛)外,毛囊其余部分都是由表皮细胞分化而来。真皮毛细胞位于毛囊基底部,是一类成纤维细胞。在毛囊发育早期,真皮细胞向单层上皮细胞发出真皮信号,刺激上皮局部形成毛基板。随后毛基板细胞向下方的真皮发出表皮信号,诱导其形成有成纤维细胞组成的凝集细胞团。在此过程中,毛母质细胞逐渐包裹凝集细胞团,形成成熟的真皮毛细胞。作为毛囊中的重要细胞群,真皮毛细胞的分子机制和临床应用正在被逐渐认识和解析。

方法简介

公司实验室分离的小鼠真皮毛细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠真皮毛细胞经层粘连蛋白荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、、酵母和等。

培养方法与步骤:

①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。

⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
原代细胞步骤


1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。

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