实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
小鼠支气管上皮细胞分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由气管分出的各级分枝，由气管分出的**支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和气管还有以区别就是，气管是以“C”型的气管软骨为支架，而支气管不是。支气管上皮是气道与外界环境接触的道防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子，从而参与气道炎症及反应。支气管上皮细胞在**、慢性阻塞性肺、肺癌、肺囊性纤维化以及一些感染性呼吸道的发病机制中均起着重要的作用。体外培养的原代支气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，因此，在基础及临床研究中极为重要。
组织来源
产品规格
货号
用途
支气管组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1767
仅供科研研究实验
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的小鼠支气管上皮细胞采用-中性蛋白酶混合消化法结合机械刮刷并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠支气管上皮细胞经PCK荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
HOECHST33342简易细胞核形态染色试剂盒
小鼠神经纤维素2(NF2)elisa检测试剂盒
大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa检测试剂盒
细胞肌酸激酶工酶混合型（CK-MB）活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒
人肝细胞生长因子(HGF)elisa检测试剂盒
植物维生素B12(VB12)elisa检测试剂盒
大鼠纤溶酶原激活剂抑制物 PAI－1 elisa检测试剂盒
细胞色素P450亚酶CYP2E（AH）活性荧光定量检测试剂盒
小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)elisa检测试剂盒
BTB/POZ结构域蛋白17抗体 BTBD17
CD40L（CD154）抗体 CD40L
利钠肽受体B抗体 Natriuretic Peptide Receptor B
磷酸化DDX58抗体 phospho-DDX58 (Thr170)
γ谷氨酰转肽酶2轻链抗体 GGT2 light chain
白介素1β抗体 IL-1 Beta
细胞色素P450 2C11抗体 Cytochrome P450 2C11
细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B抗体 CDKN2B/p15 INK4b
L型钙通道蛋白a1亚型3抗体 CACH3
MSH源蛋白1样蛋白抗体 MSX1
人微管相关蛋白Tau-4抗体 Human Tau-4
溶质载体家族蛋白38成员A10抗体 SLC38A10
睾丸特异性碱性蛋白Y2抗体 BPY2
骨形态发生蛋白8抗体 BMP8b
脂肪瘤相关蛋白抗体 LIM protein/LPP
猪细小病毒VP2蛋白抗体 PPV VP2
人A激酶PRKA锚定蛋白12(Akap12)elisa分析检测试剂盒
小鼠支气管上皮细胞超氧阴离子自由基终点比色法定量检测试剂盒
小鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)elisa分析检测试剂盒
IFN kappa; IFN-kappa; Ifnk; IFNK_HUMAN; Interferon kappa.
小鼠脂肪干细胞
兔结肠平滑肌细胞
其它
KYSE-520人食管鳞状细胞癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；