细胞简介:
小鼠主动脉外膜成纤维细胞分离自主动脉血管外膜组织;血管外膜是由疏松结缔组织组成,其中含螺旋状或纵向分布的弹性纤维和胶原纤维。血管壁的结缔组织细胞以成纤维细胞为主,当血管受损伤时,成纤维细胞具有修复外膜的能力。有的动脉中膜和外膜的交界处,有密集的弹性纤维组成的外弹性膜。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的血管外膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。血管外膜成纤维细胞是血管外膜的主要组成细胞之一,其主要生理功能合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
组织来源
产品规格
货号
用途
主动脉组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1778
仅供科研研究实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传1-2代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的小鼠主动脉外膜成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠主动脉外膜成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死; (2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;
实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
公司正在出售的产品:
大量蛋白样品液相法去内试剂盒
细胞肉毒碱棕榈酰转移酶I(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE I)活性比色法定量检测试剂盒
人基质细胞衍生因子1a(SDF1A)elisa分析检测试剂盒
大鼠基质Gla蛋白(MGP)elisa检测试剂盒
猪白介素10(IL-10)elisa分析检测试剂盒
猪肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)elisa分析检测试剂盒
大鼠血管紧张素II(ANG II)elisa检测试剂盒
燕麦β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒
小鼠C型钠尿肽(CNP)elisa检测试剂盒
19号染色体开放阅读框54抗体 C19orf54
20号染色体开放阅读框50抗体 C20orf50
活化B细胞因子1抗体 MSC/Musculin
肌肉糖原磷酸化酶抗体 PYGM
PE标记人CD57单克隆抗体 human CD57/PE
PTB结合核蛋白2抗体 RAVER2
受精卵抑制蛋白1样蛋白抗体 ZAR1L
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MST4抗体 MST4
FAM63A蛋白抗体 FAM63A
FITC标记人CD117 (c-kit)单克隆抗体 human CD117 (c-kit)/FITC
磷酸化周期素E2抗体 phospho-Cyclin E2 (Thr396)
鳞状细胞癌增强蛋白1抗体 GASC1/KDM4C
蛋白激酶Cε型抗体 phospho-PKC Epsilon (Ser729)
蛋白质磷酸酶2调节亚基5D/PP2A-B56-δ抗体 PPP2R5D
锌指蛋白839抗体 ZNF839
血管内皮锌指蛋白1抗体 ZNF161
小鼠肾素(Renin)elisa检测试剂盒
小鼠主动脉外膜成纤维细胞大鼠丙二酸单酰辅酶A(malonyl CoA)elisa检测试剂盒
细胞过氧化酶活性染色试剂盒
E1; E1 envelope glycoprotein; Glycoprotein E1; Spike glycoprotein E1; POLS_RUBVM.
猪骨髓间充质干细胞
兔角膜基质细胞
CHO-K1(仓鼠卵巢细胞亚株)
LC-1/sq-SF人非小细胞肺癌细胞