实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
自然杀伤细胞 (natural killer cell,NK)是机体重要的细胞,不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身性的发生。一种稳定表达在NK和LAK细胞表面的LAK-1分子,120kDa,NK细胞在IL-2条件下培养20天LAK-1仍为阳性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的杀伤活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。
自然杀伤细胞刺激因子( natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 对NK细胞有刺激作
组织来源
产品规格
货号
用途
外周血组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2178
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常外周血组织。
2)细胞鉴定:CD56或CD16荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:圆形或椭圆形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 NK 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
hs-CRPELISAKit
植物茄呢醇磷酸酶1(SPS1/SPPS/SPS)elisa分析检测试剂盒
SPS1/SPPS/SPS ELISA kit
人促睡眠肽(DSIP)elisa分析检测试剂盒
DSIPELISAKit
细胞单胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量检测试剂盒
牛γ氨基丁酸(GABA)elisa检测试剂盒
磷酸果糖激酶(PFK)/6-磷酸果糖激酶/果糖-6-磷酸激酶测试盒
小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)elisa检测试剂盒
KIAA0907蛋白抗体
KIAA0907
阳离子转运调节样蛋白2抗体
CHAC2
山羊甲状旁腺(PTH)elisa检测试剂盒
饲料三聚氰胺快速显色定性检测试剂盒(家用型/工业型)
纯化线粒体膜通道孔(MPTP)红色荧光(TMRM)检测试剂盒
大鼠脂联素(Acrp30,ADT)elisa检测试剂盒
RRP4蛋白抗体
RRP4
细胞角蛋白26抗体
KRT26
超氧化物歧化酶3抗体 Anti-SOD3
蛋白质磷酸酶2A-B55抗体 Anti-PPP2R2B/PP2A-B55
血浆谷氨酸羧肽酶抗体 Anti-PGCP
内质网膜蛋白UNC93B抗体 Anti-UNC93B
产品分类: 抗体 / 二抗 1mg 10mg
兔NK细胞Rabbit Anti-Mouse Kappa light chain / PE-Cy5.5
视网膜母细胞瘤结合蛋白5抗体
Calcium channel L type DHPR alpha 2 subunit; CA2D1_HUMAN; CACN A2; CACNA2; CACNA2D1; CACNL2A; Calcium channel L type alpha 2 polypeptide; Calcium channel voltage dependent alpha 2/delta subunit 1; CCHL2A; Dihydropyridine receptor alpha 2 subunit; Dihydropyridine sensitive L type calcium channel alpha 2/delta subunit; Dihydropyridine sensitive L type calcium channel subunits alpha 2/delta; H_DJ0560O14.1; L type calcium channel subunit alpha 2; MHS 3; MHS3; Voltage dependent calcium channel subunit alpha 2/delta 1; Voltage gated calcium channel subunit alpha 2/delta 1; Voltage-dependent calcium channel subunit delta-1; Voltage-gated calcium channel subunit alpha-2/delta-1; WUGSC:H_DJ0560O14.1.
兔NK细胞
人肝窦内皮细胞
Saos-2人骨肉瘤细胞
RBE人肝胆管癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;