实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
血液中的单核细胞来源于骨髓干细胞分化出的髓样干细胞,是机体防御系统的一个重要组成部分。单核细胞能吞噬异物产生抗体,在机体损伤、抗御病原的入侵和对的方面起着重要的作用。机体发生炎症或其他都可引起单核细胞总数百分比发生变化,因此检查单核细胞计数成为辅助诊断的一种重要方法。
组织来源
产品规格
货号
用途
外周血组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2176
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常外周血组织。
2)细胞鉴定:MO-1或MO-2荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:圆形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 巨噬 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
大鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)elisa检测试剂盒
大鼠凋亡诱导因子(AIF)elisa检测试剂盒
小鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)elisa检测试剂盒
人八聚体转录因子(OTF2B)elisa检测试剂盒
组织硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒
小鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)elisa检测试剂盒
齐墩果酸含量测试盒
载玻片细胞TRAIL 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
绵羊白蛋白(Albumin)elisa分析检测试剂盒
GSK3B相互作用蛋白抗体 NIN
G蛋白偶联受体35抗体 GPR35
脑肠肽抗体 Ghrelin
酿酒酵母NAS6蛋白抗体 NAS6
二酰基甘油酰基转移酶2样蛋白4抗体 DGAT2L4
防御素β-119/β-defensin 119抗体 DEFB119
羊毛甾醇14α-去甲基化酶蛋白抗体 CYP51A1
胰腺抗体 Pancreatic hormone
SGCE蛋白抗体 SGCE
S腺苷L-型半胱氨酸水解酶抗体 SAHH
源盒蛋白Meis1抗体 MEIS1
脱氧胞苷脱氨酶蛋白抗体 APOBEC3G
胶质细胞谷氨酸运载蛋白3/神经/上皮细胞谷氨酸运载蛋白抗体 EAAT3
精神分裂症易感基因抗体 DTNBP1
6号染色体开放阅读框204抗体 C6orf204
AF680标记的波形蛋白抗体 Vimentin, Alexa Fluor 680 conjugated
细胞琥珀酸脱氢酶活性染色试剂盒
兔单核细胞植物花色苷测试盒
人谷氨酸脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)elisa分析检测试剂盒
erythroid derived 2; like 1; Locus control region factor 1; Locus control region-factor 1; NF-E2-related factor 1; NF2L1_HUMAN; NFE2 related factor 1; NFE2-related factor 1; NFE2L1; NRF-1; NRF 1; Nuclear factor; Nuclear factor erythroid 2-related factor 1; Nuclear factor erythroid derived 2 like 1; TCF-11; TCF11; Transcription factor 11; Transcription factor HBZ17; Transcription factor LCR F1; Transcription factor LCR-F1.
兔单核细胞
人附睾平滑肌细胞
WM-115人恶性黑色素瘤细胞
RKO-E6人结肠癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;