实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
腹腔主动脉是人体的大动脉,直接延续于发自左心室的主动脉,胸腔主动脉,沿脊柱左侧下行,主要负责腹腔脏器和腹壁的血液供应。主动脉是由内膜、中层弹力层和外膜构成,三层紧密贴合在一起。其中,外膜是专门的支持组织,外膜成纤维是外膜的主要成分,在血管炎症反应、血管重塑等方面发挥重要作用。
组织来源
产品规格
货号
用途
主动脉组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2031
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常主动脉组织。
2)细胞鉴定:波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
细胞络磷酸酶(TP)活性荧光定量检测试剂盒
β-甘露糖苷酶溶酶体样蛋白抗体
MANBAL
17号染色体开放阅读框78抗体
C17orf78
冰冻切片组织IP3R受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
犬N端前心钠肽(NT-ProANP)elisa分析检测试剂盒
大鼠17-α甲睾酮(17-αMT)elisa检测试剂盒
小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)elisa检测试剂盒
原钙粘附蛋白β14抗体
PCDHB14
凋亡加强结构域蛋白8抗体
CARD8
TWIST蛋白抗体 Anti-TWIST protein
蛋白酶激活受体-1抗体 Anti-PAR-1/Thrombin receptor
磷酸化蛋白激酶A受体2α亚基抗体 Anti-phospho-PKA R2 (Ser96)
神经细胞囊泡循环蛋白1抗体 Anti-Synaptogyrin 1
FITC标记的兔抗羊IgM
Rabbit Anti-Goat IgM / FITC
EFCAB4A蛋白抗体
EFCAB4A
锌指蛋白288抗体 Anti-ZNF288/ZBTB20
乳腺癌细胞分化因子P45抗体 Heregulinβ Anti-NRG1/HRG beta 1
RhoA抗体 Anti-RhoA
S100A14/15抗体 Anti-S100A14
大鼠CC趋化因子受体9(CCR9)elisa分析检测试剂盒
兔腹腔主动脉外膜成纤维细胞活体细胞线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒
山羊过氧化氢酶(CAT)elisa分析检测试剂盒
HePTP; BPTP 4; BPTP4; Dual specificity phosphatase 1; Hematopoietic protein tyrosine phosphatase; LC PTP; LCPTP; LPTP; Protein tyrosine phoshatase non receptor type stress induced; Protein tyrosine phoshatase nonreceptor type stress induced; Protein tyrosine phosphatase LC PTP; Protein tyrosine phosphatase non receptor type 7; PTPN 7; PTPNI; Tyrosine protein phosphatase non receptor type 7; PTN7_HUMAN.
兔腹腔主动脉外膜成纤维细胞
人肺动脉高压血管内皮细胞
Snu-387人肝癌细胞
RPMI8226人多发性骨髓瘤细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;