实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
肝星状细胞( HSC)位于Disse间隙内,紧贴着肝窦内皮细胞和肝细胞。其形态不规则,胞体呈圆形或不规则形,常伸出数个星状胞突包绕着肝血窦。此外,HSC还伸出胞突与肝细胞、邻近的星状细胞相接触。HSC是ECM的主要来源, HSC激活并转化为肌成纤维细胞样细胞(MFC),各种致纤维化因素均把HSC作为终靶细胞。
肝星状细胞激活并转化为肌成纤维细胞样细胞 (MFC),各种致纤维化因素均把HSC作为终靶细胞,正常情况下肝星状细胞处于静止状态。当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时,肝星状细胞被激活,其表型由静止型转变⤮タ⤮
组织来源
产品规格
货号
用途
肝组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2062
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常肝组织。
2)细胞鉴定:结蛋白(Desmin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭状,星状细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 星状 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
豚鼠白介素5(IL-5)elisa检测试剂盒
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突触结合蛋白11抗体 Synaptotagmin XI
微管蛋白折叠辅助因子E样抗体 TBCEL
RTDR1蛋白抗体 RTDR1
SH3结构域激酶结合蛋白1抗体 SH3KBP1
8-羟基鸟嘌呤DNA糖基化酶 OGG1
AF647标记的程序性死亡配体1(CD274)抗体 PD-L1, Alexa Fluor 647 conjugated
钾离子通道多聚体结构域蛋白10抗体 KCTD10
角蛋白相关蛋白KAP8.1抗体 KAP8.1
乙酰化化组蛋白H2B (Lys120)鼠单克隆抗体 Histone H2B (Acetyl K120)
尤文肉瘤FLI1蛋白抗体 FLI1
二氢叶酸还原酶抗体 DHFR
防御素α5抗体 Defensin alpha 5
GRHL1蛋白抗体 GRHL1
G蛋白偶联受体1抗体 GPR1
囊泡转运蛋白SEC22C抗体 SEC22C
尿激酶型纤溶酶原激活因子抗体 Urokinase
大鼠白介素13(IL13)elisa检测试剂盒
兔肝星状细胞Goat Anti-Rabbit IgG H&L / PE-Cy3
滤泡型转运蛋白1/II型慢性性白血病抗体
TDRD 3; tdrd3; TDRD3_HUMAN; Tudor domain containing 3; Tudor domain containing protein 3; Tudor domain-containing protein 3; 4732418C03Rik; 6720468N18; FLJ21007; OTTHUMP.
兔肝星状细胞
人胆脂瘤细胞
TJ905人脑胶质瘤
RWPE-1人前列腺正常细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;