实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
肥大细胞( Mast cell, MC)是和血液的嗜碱粒细胞一样,具有强嗜碱粒颗粒的组织细胞,细胞核小,位于细胞中央。
MC分泌多种细胞因子,参与调节。此外,还表达MHC分子,B7分子。有研究表明,MC在超敏反应如支气管**的致病方面起着重要作用,在自身如多发性硬化、类风湿关节炎中起作用。
组织来源
产品规格
货号
用途
骨髓组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2184
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常骨髓组织。
2)细胞鉴定:CD117荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:圆形或卵圆形细胞,悬浮培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 肥大 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
饮料果胶化学比色法定量检测试剂盒
细胞血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒
人补体片段3c(C3c)elisa检测试剂盒
大鼠胆囊收缩素八肽(CCK-8)elisa检测试剂盒
小鼠载脂蛋白A4(APOA4)elisa检测试剂盒
唾液酸结合性球蛋白样凝集素1抗体 Anti-Sialoadhesin
染色体浓缩调节蛋白2抗体 Anti-RCC2
轴突蛋白2抗体 Anti-Neurexin 2
富含脯氨酸源蛋白1抗体 Anti-WASF1/WAVE 1
转录因子ELYS蛋白抗体 ELYS
自分泌运动因子抗体 ENPP2
核RNA结合蛋白P54抗体 NMT55
核糖体蛋白S6激酶样1抗体 RPS6KL1
NKAPL蛋白抗体 NKAPL
P2Y4受体抗体 P2Y4
三磷酸腺苷受体P2X5b抗体 P2X5b
神经生长因子β重组兔单克隆抗体 NGF
DNAJB14蛋白抗体 DNAJB14
D激酶衰减蛋白2抗体 DOK2
磷酸化分化相关基因NDRG1抗体 Phospho-NDRG1 (Thr346)
磷酸化磷酯酶Cγ2抗体 Phospho-PLCG 2 (Tyr1217)
表皮生长因子样蛋白6抗体 EGFL6
叉头蛋白P2抗体 FOXP2
腺苷酸环化酶激活肽-27/38抗体 PACAP-27/38
锌指蛋白547抗体 ZNF547
小鼠金属硫蛋白2(MT-2)elisa检测试剂盒
兔骨髓肥大细胞PKC ELISA Kit
山羊β-脂蛋白(β-LP)elisa分析检测试剂盒
LAMB2; Laminin beta 2; Laminin subunit beta 2; LAMS; S laminin; LAMB2_HUMAN.
兔骨髓肥大细胞
人肠系膜动脉平滑肌细胞
Hs 688(A.T人黑素瘤细胞
SCC-25人舌鳞癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;