实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
结膜松弛症( conjunctivochalasis,CCh)是由于球结膜过度松弛和(或)下睑缘张力高,造成松弛球结膜堆积在眼球与下睑缘、内外眦部之间,形成皱褶,引起眼表泪液分布异常,并伴有眼部不适如流泪、干涩、异物感等症状的眼病。有研究表明结膜松弛症中结膜成纤维细胞的改变,影响细胞外基质成分的平衡状态和稳定性,可能是结膜松弛症发生的原因。
组织来源
产品规格
货号
用途
眼球。
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2220
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的眼球。
2)细胞鉴定:结蛋白(Desmin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
CP/CERELISAKit
大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4)elisa分析检测试剂盒
MCP-4 ELISA kit
人睫状神经营养因子(CNTF)elisa分析检测试剂盒
HumanCNTFELISAKit
小鼠p16基因甲基化检测试剂盒
人Ⅱ型胶原代谢产物C2C(C2C)elisa检测试剂盒
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HSV-Ag1ELISAKit
大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)elisa检测试剂盒
小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)elisa检测试剂盒
人补体片断5b(C5b)elisa检测试剂盒免费代测
植物磷酸葡萄糖酸脱氢酶(phosphogluconate dehydrogenase;PGD)电泳分析试剂盒
致癌基因N myc相互作用因子抗体
N myc interactor
3号染色体开放阅读框39抗体
C3orf39
神经元蛋白22抗体 Anti-TAGLN3/NP22
前列腺癌相关蛋白4抗体 Anti-PAGE4
磷酸化细胞核因子NF-κB p65抗体 Anti-Phospho-NFKB p65(Ser468)
血清应答因子抗体 Anti-SRF
Cy7标记的兔抗水IgG H&L
兔结膜成纤维细胞Rabbit Anti-Dog IgM / RBITC
外纺锤体极样蛋白1抗体
IFN alpha N protein; Interferon alpha WA; Interferon, alpha 16; IFN16_HUMAN.
兔结膜成纤维细胞
人NK细胞
DMS 79人小细胞肺癌细胞
SK-HEP-1人肝腹水腺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;