实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
膀胱壁由三层组织组成,由内外为粘膜层、肌层和外膜。其中,粘膜层为极薄的一层移行上皮组织,和输尿管及尿道黏膜彼此连贯。体外培养膀胱上皮细胞不仅为组织工程膀胱,尿道提供种植细胞的必要手段,也是研究移行上皮细胞肿瘤发生和的基础与前提。
组织来源
产品规格
货号
用途
膀胱组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2085
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常膀胱组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 上皮 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
植物原花青素测试盒
钾离子通道蛋白15抗体
KCNK15
Rho鸟甘酸转运蛋白抗体
ARHGEF11
组织MKK6激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
人HSP60 IgM抗体elisa检测试剂盒
大鼠Toll样受体4(TLR4)elisa检测试剂盒免费代测
小鼠肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)elisa检测试剂盒
肌球蛋白轻链7抗体
MYL7
3号染色体开放阅读框21抗体
C3orf21
跨膜蛋白158抗体 Anti-TMEM158
RNA结合蛋白片段Y染色体家族蛋白1抗体 Anti-RBMY1A1
核受体辅助抑制因子2抗体 Anti-NCoR2
可溶性载质转运蛋白SLC24A5抗体 Anti-SLC24A5
β淀粉样肽1-42单克隆抗体
beta-Amyloid (1-42)
DHTKD1蛋白抗体
DHTKD1
结肠抗原10抗体 Anti-SDCCAG10
谷氨酸受体2C抗体 Anti-NR2C/NMDAR2C
ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗体 Anti-Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D
粘液样脂肪肉瘤蛋白FUS1抗体 Anti-TLS/FUS
大鼠蛋白聚糖4(PRG4)elisa分析检测试剂盒
兔膀胱上皮细胞小鼠β1肾上腺素能受体(β1AR)抗体elisa分析检测试剂盒
大鼠载脂蛋白B(Apo B)elisa检测试剂盒
Including osteosarcoma; OSRC; Osteosarcoma; P105 RB; p105-Rb; P105RB; PP105; PP110; PPP1R130; pRb; pRb; Prepro retinoblastoma associated protein; Protein phosphatase 1 regulatory subunit 130; RB 1; Rb; RB_HUMAN; RB1; RB1 gene; RB1 protein; Retinoblastoma 1 (including osteosarcoma); Retinoblastoma 1; Retinoblastoma 1; Retinoblastoma associated protein; Retinoblastoma related osteosarcoma; Retinoblastoma susceptibility gene; Retinoblastoma suspectibility protein; Retinoblastoma-associated protein.
兔膀胱上皮细胞
大鼠主动脉瓣膜间质细胞
HCT-8/LUC (STR)人结肠癌细胞带荧光素酶
Snu-1人胃癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;