实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
脾是重要的器官，有造血、滤血、衰老血细胞及参与反应等功能。也是细胞迁移和接受抗原刺激后发生应到、产生效应分子的重要场所。
内皮祖细胞具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构。其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。
组织来源
产品规格
货号
用途
脾脏组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2181
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）组织来源于实验动物的正常脾脏组织。
2)细胞鉴定：CD31或CD34荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 内皮祖 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
体液单胺氧化酶B型（MAO－B）活性化学发光法定量检测试剂盒
Malectin蛋白抗体
Malectin/MLEC
三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX23抗体
DDX23
饮料二氧化碳（CO2）浓度酶偶联反应比色法定量检测试剂盒
人P2蛋白抗体(IgG)elisa检测试剂盒
大鼠α-乳清蛋白(αLA)elisa检测试剂盒
小鼠神经营养因子4(NT4)elisa检测试剂盒
原钙粘附蛋白α2抗体
PCDHA2
缺氧诱导基因1蛋白/HIGD1A抗体
HIG1/HIGD1A
磷酸化非受体型蛋白激酶Tnk1抗体 Anti-Phospho-TNK1 (Tyr277)
磷酸化星形胶质细胞PEA15抗体 Anti-Phospho-PEA15(Ser116)
磷酸肌醇磷脂酶PLCZ1抗体 Anti-PLCZ1
突触结合蛋白11抗体 Anti-Synaptotagmin XI
FITC标记的兔抗狗IgG H&L
Rabbit Anti-Dog IgG H&L / FITC
磷酸化腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体
phospho-ABCA1 (Ser2054)
锌指蛋白804A抗体 Anti-ZNF804A
神经细胞凋亡抑制蛋白抗体 Anti-NAIP
小鼠抗人红细胞单克隆抗体 Anti-RBC(G2H4)
磷酸化沉默调节相关蛋白6抗体 Anti-phospho-SIRT6(Ser338)
大鼠CD68分子(CD68)elisa分析检测试剂盒
兔脾源性内皮祖细胞Rabbit Anti-Guinea Pig IgM / Gold
甘丙肽受体1抗体
Glutamate [NMDA] receptor associated protein 1; Glutamate receptor, ionotropic, N methyl D aspartate associated protein 1 (glutamate binding); Glutamate receptor, NMDA subtype, glutamate binding subunit; HNRGW; LFG1; MGC99687; NMDA receptor glutamate binding subunit; NMDARA1; Putative MAPK activating protein PM02; TMBIM3; Transmembrane BAX inhibitor motif containing 3; LFG1_HUMAN.
兔脾源性内皮祖细胞
大鼠脂肪微血管内皮细胞
CMT93(鼠结肠癌细胞)
Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；