实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
舌表皮细胞经常轻度教化脱落,与唾液和食物碎屑混合而形成一层白色薄苔。表皮细胞的主要作用是保护,同时还兼有其他功能,如分泌角质层等,具有很强的角质化特征。
组织来源
产品规格
货号
用途
舌组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2229
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常舌组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 角质形成 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
小鼠雌硫酸转移酶(SULT1E1)elisa检测试剂盒
人趋化因子(CCL5/RANTES)elisa检测试剂盒
土壤汞元素荧光定量检测试剂盒
猪Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)elisa分析检测试剂盒
大鼠细胞周期素D1(CCND1)elisa检测试剂盒
组织环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1/2)总活性荧光定量检测试剂盒
人P选择素(P-Selectin)elisa检测试剂盒
大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa分析检测试剂盒
小鼠生长分化因子11(GDF11)elisa检测试剂盒
真核启动因子2α(eIFα2)兔单克隆抗体 EIF2S1
指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体 Noggin
钙调节蛋白-1抗体 Calponin 1
肝脏X受体抗体 LXR alpha
I型胶原蛋白 Collagen alpha-1(I) chain
KIAA1958蛋白抗体 KIAA1958
亲环蛋白(亲环素)PPIB(内参)重组兔单克隆抗体 Cyclophilin B(Loading Control)
染色体结构维持蛋白2抗体 SMC2
ATP6V1B2蛋白抗体 ATP6V1B2
BHLHE41单克隆抗体 BHLHE41
跨膜蛋白SEMA5B抗体 Semaphorin 5B
类表皮生长因子域7抗体 EGFL7
ZMYND12蛋白抗体 ZMYND12
β衣被蛋白抗体 beta COP
细胞骨架相关蛋白1/微管蛋白折叠辅助因子B抗体 CKAP1
纤维母细胞生长因子6抗体 FGF6
大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PPARγC1α)elisa检测试剂盒
兔舌表皮细胞CDCP1 ELISA kit
人高密度脂蛋白3(HDL3)elisa分析检测试剂盒
Protein Z, vitamin K dependent plasma glycoprotein; PROZ; PROZ_HUMAN; PZ antibody Vitamin K-dependent protein Z.
兔舌表皮细胞
大鼠胰腺星状细胞
MAEC
SW1116人结肠腺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;