实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
髓核是乳白色半透明胶状体，富于弹性，为椎间盘结构的一部分，位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。
髓核细胞的过早衰老与凋亡是导致椎间盘退行性变过程的主要原因之一，主要表现为退变椎间盘内髓核细胞功能降低和数量减少，使得其 Ⅱ型胶蛋白聚糖等基质分泌量下降，终导致椎间盘维持脊柱高度、承受各方应力等生物力学功能丧失。
组织来源
产品规格
货号
用途
椎间盘组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2145
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）组织来源于实验动物的正常椎间盘组织。
2)细胞鉴定：Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：梭形或多角形细胞，不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 软骨 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
小鼠白介素31(IL-31)elisa检测试剂盒
人醛固酮（ALD）elisa检测试剂盒
酵母菌YNB培养基
鱼球蛋白A(IgA)elisa分析检测试剂盒
大鼠双氢睾酮(DHT)elisa检测试剂盒
冰冻切片淀粉样蛋白（AMYLOID）染色试剂盒
人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)elisa检测试剂盒
大鼠白三烯C4(LTC4)elisa分析检测试剂盒
小鼠纤溶酶原激活剂抑制物（PAI-1）elisa检测试剂盒
DNAJC11蛋白抗体 DNAJC11
D型-过氧化酶活化受体抗体 PPAR delta + beta
磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体 phospho-CaMK2 alpha (Tyr230)
磷酸化酶激酶γ1 PHKG1
表皮细胞表面抗原1/Esa1抗体 Flotillin 2
叉头蛋白S1抗体 FOXS1
腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗体 AMPK gamma 1
锌指蛋白142抗体 ZNF142
OTUD1蛋白抗体 OTUD1
PE-Cy5标记人CD55单克隆抗体 human CD55/PE-Cy5
神经母细胞瘤源性分泌蛋白抗体 C1orf76
神经元核抗原抗体 NeuN
核糖核酸结合蛋白2抗体 PTBP2
黑色素瘤相关突变抗原1样蛋白1抗体 MUM1L1
转化生长因子β活化激酶1 TAK1
自噬相关蛋白9B抗体 ATG9B
大鼠过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)elisa检测试剂盒
兔髓核细胞IL-6 ELISA KIT
人基质金属蛋白酶12(MMP-12)elisa分析检测试剂盒
EAP1; EXOS7_HUMAN; Exosc7; Exosome complex component RRP42; Exosome complex exonuclease RRP42; Exosome component 7; FLJ26543; hRrp42p; KIAA0116; p8; Ribosomal RNA processing protein 42; Ribosomal RNA-processing protein 42; RRP42; Rrp42p.
兔髓核细胞
大鼠胸腺基质细胞
小鼠精母细胞；GC-2 spg （种属鉴定）
T24人膀胱移行细胞癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；