实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
纤维环，位于椎间盘的周缘部，由纤维软骨组成，纤维环的纤维在椎体间斜行，在横切面上排列成同心环状，相邻环的纤维具有相反的斜度，而相互交叉。纤维环细胞位于胶原纤维束之前，合成和分泌纤维环细胞外基质，维持正常的纤维环结构和功能。
组织来源
产品规格
货号
用途
椎间盘组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2144
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）组织来源于实验动物的正常椎间盘组织。
2)细胞鉴定：Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)或Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：多角形细胞，不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 软骨 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
人白介素1受体相关激酶-4(IRAK-4)elisa检测试剂盒免费代测
脂肪瘤高迁移率融合蛋白样蛋白3抗体
LHFPL3
胸腺基质细胞**素受体抗体
CRLF2
全组织神经元高尔基法（GOLGI）染色试剂盒
人γ分泌酶elisa检测试剂盒
大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)elisa检测试剂盒
小鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)elisa检测试剂盒
RNA结合蛋白NOB1抗体
NOB1
生长抗体
Growth Hormone
乳腺癌抗雌抵抗蛋白2抗体 Anti-TReP132/RAPA
磷酸化6磷酸果糖激酶2抗体 Anti-Phospho-PFK2 (Ser467)
磷酸化磷脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗体 Anti-phospho-PIK3 gamma (Ser1101)
信号肽肽酶SPP抗体 Anti-SPP/Signal Peptide Peptidase
T细胞激活蛋白6E抗体
LY6E/Stem cell anti 2
嗅觉受体5AP2抗体
OR5AP2
信号通路Wnt2B抗体 Anti-WNT2B
NIFK蛋白抗体 Anti-NIFK
环指蛋白180抗体 Anti-RNF180
肺表面活性蛋白B抗体 Anti-SP-B
大鼠β细胞素(BTC)elisa分析检测试剂盒
兔纤维环细胞Rat Substance P ELISA Kit
人骨涎蛋白(BSP)elisa分析检测试剂盒
Divergent upstream protein; DNA mismatch repair protein; DNA mismatch repair protein Msh 3; DNA mismatch repair protein Msh3; DUC 1; DUC1; DUG; DUP; hMSH3; MGC163306; MGC163308; Mismatch repair protein 1; MRP 1; MRP1; MSH 3; MSH3; MSH3_HUMAN; MutS homolog 3 (E. coli); MutS homolog 3.
兔纤维环细胞
大鼠心脏微血管内皮细胞
小鼠黑色素瘤细胞；B16B
Tca8113(舌癌细胞)
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；