实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
心脏作为终末分化器官,然而近年来研究证实了心脏包含了可以再生的细胞,即心肌干细胞。干细胞移植作为一种心脏的新方法收到了广泛的关注。此外,来源于同一器官的干细胞可避免异体干细胞移植导致的排斥等风险。心肌干细胞主要分化为心肌细胞,也可分化为血管内皮细胞与平滑肌细胞。
组织来源
产品规格
货号
用途
心脏组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2034
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常心脏组织。
2)细胞鉴定:C-kit或Sca-1荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代间充质干细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
eNOS-3ELISAKit
大鼠α1抗胰蛋白酶前体(pre-α1-AT)elisa分析检测试剂盒
pre-α1-AT ELISA Kit
人过氧化氢酶(CAT)elisa分析检测试剂盒
CATELISAkit
细胞SPHK激酶总活性比色法定量检测试剂盒(510)
人白介素24(IL-24)elisa检测试剂盒
大鼠补体蛋白4(C4)elisa检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3/Flt-4)elisa检测试剂盒
孕/孕酮(PROG)elisa分析检测试剂盒
PROG ELISA kit
人白介素增强子结合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)elisa分析检测试剂盒
HumanILF2ELISAkit
组织ABL1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
人核基质蛋白22(NMP22)elisa检测试剂盒
大鼠花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)elisa检测试剂盒
植物维生素D2(VD2)elisa分析检测试剂盒
中性鞘磷脂2抗体
NSMase2
甲型流感病毒(H2N2)血凝素抗体
H2N2 Hemagglutinin
TRIM50蛋白抗体 Anti-TRIM50
脯氨酸羟化酶抗体 Anti-PHD3
6磷酸果糖激酶抗体 Anti-PFKL/Fructose 6 Phosphate Kinase
丝氨酸蛋白酶抑制剂A10抗体 Anti-ZPI/SERPINA10
Cy5.5标记的小鼠抗兔IgM
兔心肌干细胞酒类L-乳酸比色法定量检测试剂盒
猪纤维蛋白原(Fbg)elisa检测试剂盒
OTTHUMP; OTTHUMP; OTTHUMP; Rab 24; RAB24; RAB24, member RAS oncogene family; RAB24_HUMAN; Ras related protein Rab 24; Ras-related protein Rab-24.
兔心肌干细胞
大鼠心肌成纤维细胞
小鼠耳蜗毛细胞;HEI-OC1
TE-1人食管癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;