实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
血管发生和发展的一个主要因素是由于血管平滑肌细胞（ smooth muscle cells, SMCs）转变成为了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌细胞能表达钙离子通道，ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表达可能是造成血管壁炎症反应，并进一步造成血管的原因 。因此，对血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和确定新的血管的靶向方法。
组织来源
产品规格
货号
用途
胸主动脉组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2044
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）组织来源于实验动物的正常胸主动脉组织。
2)细胞鉴定：平滑肌肌动蛋白（α-SMA）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：长梭形、不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代平滑肌细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)/果糖-1,6-二磷酸酯酶测试盒
蓝藻果聚糖化学法比色法定量检测试剂盒
总胆固醇TCH酶法测试盒液体 100ml 手工/半自动
大鼠双氢睾酮（DHT）elisa检测试剂盒
纯化线粒体蛋白氧化（羰基化；carbonyl）比色法测定试剂盒
组织MAPKAP KINASE3激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
人半乳糖(Galactose)elisa分析检测试剂盒
大鼠成纤维细胞生长因子10(FGF10)elisa检测试剂盒
小鼠胰岛素受体底物2(IRS2)elisa检测试剂盒
四分子交联体4/四旋蛋白4/四次跨膜蛋白4抗体 TSPAN4
糖蛋白VI/六糖蛋白抗体 Glycoprotein VI
PRAM1蛋白抗体 PRAM1
RASL10B蛋白抗体 RASL10B
2’,3’-环腺苷酸-3’-磷酸二酯酶重组鼠单克隆抗体 CNPase
3号染色体开放阅读框37抗体 C3orf37
肌球蛋白1F抗体 MYO1F
畸胎瘤衍化生长因子抗体(N端) CRIPTO
血管内皮生长因子受体1重组兔单克隆抗体 VEGFR1
岩藻糖转移酶2抗体 FUT2
蛋白酶体激活因子PA28γ抗体 PSME3
凋亡相关蛋白2抗体 PDCD2
FC段IgE受体α多肽/Fc ε RIα抗体 Fc ε RIα/Fc epsilon RI
FITC标记小鼠CD49d单克隆抗体 mouse CD49d/FITC
磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）重组兔单克隆抗体 PI3-kinase p110 subunit beta
膜相关磷脂转运蛋白抗体 NIR1
鱼溶菌酶(肾淀粉样变)(LZM)elisa分析检测试剂盒
兔胸主动脉平滑肌细胞Mouse Anti-Rabbit IgG H&L / FITC
范可尼贫血相关蛋白M抗体
RHOA_HUMAN; RhoA protein; Aplysia ras related homolog 12; ARH 12; ARH12; ARHA; H 12; Oncogene RHO H12; Ras homolog gene family member A; RHO 12; Rho A; RHO H12; RHO12; RHOH 12; RHOH12; Small GTP binding protein Rho A; Small GTP binding protein RhoA; Transforming protein Rho A; Transforming protein RhoA.
兔胸主动脉平滑肌细胞
大鼠小肠成纤维细胞
RM-1+LUC小鼠前列腺癌细胞荧光素酶标记
TOV-112D人上皮性卵巢癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；