实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
树突状细胞( Dendritic cells, DC)是机体功能强的专职抗原递呈细胞,它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原,未成熟DC具有较强的迁移能力,成熟DC能有效激活初始型T细胞,处于启动、调控、并维持应答的中心环节。
DC的来源有两条途径:
①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC,称为髓样DC,也称DCl,与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞;包括朗格汉斯细胞,间皮(或真皮)DCs以及单核细胞衍生的DCs等。
②来源于样干细胞,称为样DC或浆细胞样DC,即DC2,与T细胞和NK细胞有共同的前体细⤮タ⤮
组织来源
产品规格
货号
用途
外周血组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1931
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常外周血组织。
2)细胞鉴定:CD11c荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:不规则细胞,半贴壁半悬浮培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代 树突状( DC) 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品:
小鼠甘氨酸脱氢酶(GLDC)elisa检测试剂盒
糖原磷酸化酶b(GPb)试剂盒
通用型总淀粉生物酶比色法定量检测试剂盒
组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)测试盒
大鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)elisa检测试剂盒
细胞半胱-7(CASPASE-7)活性比色法定量检测试剂盒
人雌二醇(E2)elisa分析检测试剂盒
大鼠的牛血清白蛋白残留检测elisa分析检测试剂盒
小鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员10A(TNFRSF10A)elisa检测试剂盒
葡萄糖转运蛋白5抗体 GLUT5
驱动蛋白家族成员25抗体 KIF25
G蛋白偶联受体66/神经调节肽U受体1抗体 NMUR1/GPR66
HER2受体抗体 HER2 receptor
有丝分裂相关蛋白INSC抗体 INSC
载脂蛋白J(APOJ)抗体 Clusterin
纺锤体极点构成蛋白25抗体 SPC25
富含精氨酸/丝氨酸剪切因子2B抗体 SFRS2B
硒酶抗体 SCLY
细胞角蛋白19抗体 Cytokeratin 19
TATA盒结合蛋白相关因子TAF1B抗体 TAF1B
T细胞负调节蛋白抗体 VSIG4
AF750标记的CD19抗体 CD19, Alexa Fluor 750 conjugated
APC-Cy5.5标记小鼠CD8a单克隆抗体 mouse CD8a/APC-Cy5.5
精子顶体前体蛋白抗体 Acrosin
跨膜丝氨酸蛋白酶13抗体 TMPRSS13
大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)elisa检测试剂盒
小鼠DC细胞Goat Anti-Chicken IgY
锌指蛋白678抗体
Dact1 / Dapper homolog 1; Dact; Dact1; DACT1_HUMAN; Dapper antagonist of beta catenin homolog 1; Dapper antagonist of catenin 1; Dapper antibodyDapper homolog 1; DAPPER1; Dpr antibodyDpr1; Frd; Frodo; hDPR1; Hepatocellular carcinoma novel gene 3 protein; Heptacellular carcinoma novel gene 3; HNG3; MTNG3; Thyex3.
小鼠DC细胞
大鼠输尿管成纤维细胞
H9c2(2-1)(大鼠心肌细胞)
U87MG人脑星形胶质母细胞瘤
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;