实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
角质形成细胞在基底层有一亚群,即表皮干细胞,它通过对称或不对称分裂产生短暂扩增细胞,短暂扩增细胞经过几代扩增后便成为终末分化的表皮角质细胞。表皮是一个可以持续自我更新的组织,因此表皮干细胞具有足够的增殖潜力,表皮干细胞不仅在体内平衡和创伤修复中其关键作用,而且是肿瘤发生和基因的主要靶标。
组织来源
产品规格
货号
用途
皮肤组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1903
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常皮肤组织。
2)细胞鉴定:p63与细胞角蛋白-14(CK-14)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代 角质形成 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品:
兔基质金属蛋白酶1(MMP-1)elisa分析检测试剂盒
人elisa分析检测试剂盒
组织尿激酶(UROKINASE)活性荧光定量检测试剂盒
小鼠半乳糖凝集素-3(Gal-3)elisa分析检测试剂盒
大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)elisa分析检测试剂盒
组织a-(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量检测试剂盒
人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa检测试剂盒
大鼠儿茶酚抑素(CST)elisa检测试剂盒
血磷浓度测试盒
GSDML蛋白抗体 GSDMB
G蛋白偶联受体31抗体 GPR31
脑表皮生长因子跨膜蛋白DNER抗体 DNER
拟南芥ACA11抗体 ACA11
二酰基甘油激酶5/DGK-ε抗体 DGKE
防御素β-114/β-defensin 114抗体 DEFB114
羊抗人球蛋白A human IgA
乙酰化酶动力蛋白3抗体 Dynamin 3 (acetyl K604)
SFXN2蛋白抗体 SFXN2
S期激酶相关蛋白1抗体 SKP1
源盒蛋白HOXC9抗体 HOXC9
脱羧酶蛋白体36抗体 CXorf36
胶质细胞谷氨酸运载蛋白1抗体 EAAT1
精神发育迟滞相关蛋白抗体 FTSJ1
6号染色体开放阅读框201抗体 C6orf201
AF750标记的白细胞共抗原CD45抗体 CD45, Alexa Flour 750 conjugated
大鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)elisa检测试剂盒
小鼠表皮干细胞大鼠铜蓝蛋白(CP)elisa检测试剂盒
植物酸性蔗糖转化酶(acid invertase)活性比色法定量检测试剂盒
IFNA F; Interferon alpha F; interferon, alpha 21; LeIF F; MGC126687; MGC126689; IFN21_HUMAN.
小鼠表皮干细胞
大鼠视网膜微血管内皮细胞
大鼠乳腺癌细胞;SHZ-88
VCAP人前列腺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;