实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
肝卵原细胞是肝脏中一种具有强大增值能力和分化潜能的干细胞，在肝脏发生损伤和缺失后，肝脏之所以有强大的再生和修复能力是肝脏中干细胞发挥作用。在肝脏受到严重急性损伤时，肝卵圆细胞被活化，可以分化为肝实质细胞和肝内胆管上皮等多种功能性细胞，修复肝脏的损伤。肝卵圆有肝内和肝外两个来源。
此外肝卵圆细胞与原发性肝癌的发生也有着密切的关系，对肝卵圆细胞的研究在多个方面都有着重要的意义。
组织来源
产品规格
货号
用途
肝组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1824
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）组织来源于处理后大鼠的肝组织。
2)细胞鉴定：c-kit或AFP荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：多角形细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 肝卵圆 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
大鼠载脂蛋白C3(APOC3)elisa检测试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)elisa检测试剂盒
鸭球蛋白E(IgE)elisa检测试剂盒
人蛋白(肽酰脯氨酰顺/反异构酶)NIMA结合1(PIN1)elisa检测试剂盒免费代测
HSV（HERPES SIMPLX）病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒
BJ5183钙转感受态
人法尼醇X受体(FXR)elisa分析检测试剂盒
大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)elisa检测试剂盒
鱼谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)elisa检测试剂盒
磷酸化转录因子E2F-1抗体 phospho-E2F1 (Ser364)
硫酸酯酶1抗体 Sulfatase 1
Endokinin-A/B抗体 Endokinin-A/B
FAM196B蛋白抗体 FAM196B
锌指蛋白923抗体 ZBTB40
胸腺肽α1抗体 Thymosin Alpha-1
促黄体素β亚单位抗体 LHB
蛋氨酸腺苷转移酶抗体 MAT2A
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶KIST抗体 KIST
丝裂原活化蛋白激酶组织蛋白1抗体 MAPK organizer 1
PE标记的前列腺素E受体蛋白4抗体 EP4, PE conjugated
PE标记小鼠H-2D(D)单克隆抗体 mouse H-2Dd/PE
14-3-3/YWHAZ蛋白抗体 2014/3/3
1号染色体开放阅读框33抗体 C1orf33
环指蛋白20抗体 RNF20
肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体 MyoGEF
体液基质金属（MMP-14）活性荧光定量检测试剂盒
小鼠肝卵圆细胞小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa检测试剂盒免费代测
昆虫跨膜蛋白提取试剂盒50T
37 kDa elastin-binding protein; Collagen/fibrinogen domain containing protein 2; Collagen/fibrinogen domain-containing protein 2; EBP 37; EBP-37; EBP37; FCN 2; Fcn2; FCN2_HUMAN; FCNL; Ficolin (collagen/fibrinogen domain containing lectin) 2 (hucolin); Ficolin B; Ficolin beta; Ficolin-2; Ficolin-B; Ficolin-beta; Ficolin2; Hucolin; L ficolin; L-ficolin; OTTHUMP; P35; RP11 263F14.2; Serum lectin p35.
小鼠肝卵圆细胞
大鼠肾近端小管上皮细胞
BEN人肺癌细胞
ZR-75-30人乳腺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；