实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
股骨头( caput femoris)呈圆形,约占一圆球的2/3,其上完全为关节软骨所覆盖,在其顶部微后有一小窝,称为股骨头凹,为股骨头韧带附着处,股骨头可由此获得少量血供。
组织来源
产品规格
货号
用途
股骨头动脉组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1927
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的股骨头动脉组织。
2)细胞鉴定:血管假性血友病因子(vWF)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代 内皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品:
人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)elisa检测试剂盒
人ES1蛋白系物,线粒体(C21orf33/HES1/KNPI)elisa分析检测试剂盒
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四分子交联体5/四旋蛋白5/四次跨膜蛋白5抗体 TSPAN5
糖蛋白β-1B抗体 Hemopexin
PRDM10k单克隆抗体 PRDM10
RASL11B蛋白抗体 RASL11B
20号染色体开放阅读框100抗体 GCX1/C20orf100
3号染色体开放阅读框38抗体 C3orf38
肌球蛋白1H抗体 MYO1H
畸形表皮自调节因子1抗体 Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1
血管内皮生长因子受体2抗体 VEGFR2
岩藻糖转移酶8抗体 FUT8
蛋白酶体抑制剂亚基PI31抗体 PSMF1
凋亡相关蛋白2重组兔单克隆抗体 PDCD2
FC段γ受体3/球蛋白G Fc段受体III单克隆抗体 CD16
FITC标记小鼠CD49e单克隆抗体 mouse/rat CD49e/FITC
磷脂酰肌醇激酶3催化亚单位3抗体 PI 3 Kinase Class 3
球蛋白D重链保守区抗体 IGHD
大鼠3氧代5α类固醇4脱氢酶2(SRD5A2)elisa分析检测试剂盒
小鼠股骨头微血管内皮细胞Mouse Anti-Rat IgG H&L / FITC
HSD13蛋白抗体
Rh -related GTP binding protein RhoB; Rh -related GTP binding protein RhoC; RHOH6; Transforming protein RhoA; AA017882 antibody Aplysia ras related homolog 9 (RhoC); ARH9; ARHA; ARHB; ARHC; H6; MST081; MSTP08; Oncogene RHO H9; rhoC GTPase; Ras homolog 9 (RhoC); Ras homolog gene family, member A; Ras homolog gene family, member B; Ras homolog gene family, member C; Rho related GTP binding protein RhoC; RHO12; RHOB; RHOC; RHOH9; RP11-426L16.4; Small GTP binding protein RhoC; H9; Rho related GTP binding protein RhoB; ARH12; ARH6; H12.RHOB_HUMAN
小鼠股骨头微血管内皮细胞
大鼠神经干细胞
BICR 78人头颈部鳞状细胞癌细胞
大鼠
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;