实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
巨噬细胞源自单核细胞,属于细胞,有多种功能,属不繁殖细胞群,难以长期培养。
巨噬细胞在吞噬和异物和衰老死亡细胞、分泌生物活性物质,调节血细胞**与参与应答等方面发挥着广泛的生物学作用,是一类在体内发挥重要效应的细胞,为体内的稳态维持和组织防御提供保障。
组织来源
产品规格
货号
用途
骨髓组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1941
仅供科研研究实验
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的正常骨髓组织。
2) 细胞鉴定:CD68或MAC387荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:圆形,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代巨噬 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
大鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)elisa检测试剂盒
组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶2B抗体
KMT2B
障碍自整合蛋白BAF重组兔单克隆抗体
BANF1
组织葡萄糖激酶(glucose kinase)比色法定量检测试剂盒
人干扰素调节因子3(IRF3)elisa分析检测试剂盒
大鼠胱抑素S(CST4)elisa检测试剂盒
鱼elisa分析检测试剂盒
NECAP1蛋白抗体
NECAP1
6号染色体开放阅读框58抗体
C6orf58
跨膜丝氨酸蛋白酶5抗体 Anti-TMPRSS5
磷酸化p21激活激酶2抗体 Anti-phospho-PAK2(Ser141)
泛素特异性蛋白酶OTB1抗体 Anti-OTUB1
14号染色体开放阅读框174 Anti-SAMD15/C14orf174
相似肿瘤抑制基因HUGL抗体
LLGL2
DNAJA4蛋白抗体
DNAJA4
玻璃粘连蛋白抗体 Anti-VTN/Vitronectin
核受体辅助抑制因子1抗体 Anti-NCoR1
视网膜色素上皮细胞特异性蛋白65抗体 Anti-RPE65
紧密连接蛋白2抗体 Anti-TJP2
大鼠白细胞抗原DR(HLA-DR)elisa分析检测试剂盒
小鼠骨髓巨噬细胞Goat Anti-Rabbit IgG H&L / APC
锌指蛋白399抗体
ACS3; B-HLH DNA binding protein; bHLHa38; BPES2; BPES3; Class A basic helix-loop-helix protein 38; CRS1; H-twist; OTTHUMP; SCS; Twist basic helix loop helix transcription factor 1; Twist homolog 1 (Drosophila); Twist homolog 1; TWIST homolog of drosophila; Twist related protein 1; Twist-related protein 1; Twist1; TWST1_HUMAN.
小鼠骨髓巨噬细胞
大鼠三叉神经星形胶质细胞
CAL 33人舌鳞状细胞癌
大鼠肝癌细胞;H-4-Ⅱ-E
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;