实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
甲状旁腺是哺乳动物体腺之一,有两对,棕黄色,分别位于左右两叶甲状腺背面的中部和下部,其主要功能为分泌甲状旁腺,调节体内钙、磷的代谢。甲状旁腺功能减退症是指甲状旁腺分泌减少或功能障碍的一种临床综合症。
组织来源
产品规格
货号
用途
甲状旁腺组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1865
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)细胞来源于实验动物的正常甲状旁腺组织。
2)细胞鉴定:PTH荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:梭形,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 上皮 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
人肝脏甘油三脂脂肪酶(HTGL)elisa检测试剂盒免费代测
犬CC趋化因子受体2(CCR2)elisa分析检测试剂盒
植物丙二醛(MDA)比色法定量检测试剂盒
小鼠骨胶原交联(Cr)elisa分析检测试剂盒
大鼠白介素2(IL-2)elisa检测试剂盒
植物磷脂酶D(Phospholipase D)总活性比色法定量检测试剂盒
人高灵敏度促甲状腺(U-TSH)elisa分析检测试剂盒
大鼠果糖二磷酸醛缩酶A(ALDOA)elisa检测试剂盒
亚硝酸还原酶(NiR)测试盒
衰老相关Sigma受体蛋白抗体 OPRS1
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SRPK2抗体 SRPK2
PE-Cy5标记小鼠CD44单克隆抗体 mouse CD44/PE-Cy5
PE标记人CD269 (BCMA)单克隆抗体 human CD269 (BCMA)/PE
组蛋白去乙酰化酶6重组兔单克隆抗体 HDAC6
17β羟类固醇脱氢酶7抗体 HSD17B7
红细胞蛋白Ank1抗体 Ankyrin-1
环指蛋白70抗体 RNF70
锌指蛋白93抗体 ZNF93
雄受体单克隆抗体
促甲状腺素β亚单位抗体 TSHB
蛋白BOC抗体 Protein BOC
ENOX1蛋白抗体 ENOX1
FAM19A3蛋白抗体 FAM19A3
磷酸化糖原合酶激酶3β抗体 phospho-GSK-3 Beta (Ser21)
磷酸化转录中介因子Tif1β抗体 phospho-TRIM28 (Ser473)
NADP磷酸酶(NADPase)测试盒
小鼠甲状旁腺细胞石蜡切片核酸氧化8-氧鸟苷(8-oxo-G)荧光染色测定试剂盒
复合消化液 10ml
Cellular thyroid hormone binding protein; Cellular thyroid hormone-binding protein; Collagen prolyl 4 hydroxylase beta; Disulphide Isomerase; DSI; EC 5.3.4.1; Endoplasmic reticulum resident protein 59; ER protein 59; ERBA2L; ERp59; GIT; Gltathione insulin transhydrogenase; Glutathione insulin transhydrogenase; P4Hbeta; p55; PDI; PDIA1; PDIA1_HUMAN; PDIR; PHDB; PO4DB; PO4HB; Procollagen proline 2 oxoglutarate 4 dioxygenase (proline 4 hydroxylase) beta polypeptide (protein disulfide isomerase associated 1); Procollagen proline 2 oxoglutarate 4 dioxygenase beta subunit; PROHB; Prolyl 4 hydroxylase beta polypeptide; Prolyl 4 hydroxylase beta subunit; Prolyl 4 hydroxylase subunit beta; Prolyl 4-hydroxylase subunit beta; Protein disulfide isomerase associated 1; Protein disulfide isomerase, family A, member 1; Protein disulfide isomerase/oxidoreductase; Protein disulfide-isomerase; Protocollagen hydroxylase; Thbp; Thyroid hormone binding protein p55; Thyroid hormone binding protein p55 cellular; V erb a avian erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 2 like.
小鼠甲状旁腺细胞
大鼠乳腺导管上皮细胞
CCF-STTG1 人脑星形胶质细胞瘤
大鼠胶质肉瘤细胞;9L/lacZ
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;