实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
结膜上皮是眼表的重要组成部分,是眼表的保护屏障,在维持泪膜的稳定性、润滑眼表、维持正常视力和眼表上皮损伤修复中发挥重要作用。上世纪 90 年代,随着人们对眼表的深入研究,提出了结膜上皮干细胞的概念,认为结膜上皮细胞的自我更新来自结膜上皮干细胞。
组织来源
产品规格
货号
用途
眼球。
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1975
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的眼球。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:扁平的椭圆形、梭形或不规则形,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf 原代 上皮 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
植物(拟南芥)超氧化物歧化酶[铜锌]1(CSD1)elisa检测试剂盒
小鼠肌红蛋白(MYO)elisa检测试剂盒
大鼠白介素1受体(IL-1RⅠ)elisa检测试剂盒
人胰岛素标准溶液
人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)elisa分析检测试剂盒
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶2C9(TOBUTAMIDE)活性
人核黄素激酶(RFK)elisa分析检测试剂盒
大鼠黄嘌呤脱氢酶(XDH)elisa检测试剂盒
植物原花青素测试盒
AF680标记的白介素1β抗体 IL-1 Beta, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750标记的甲胎蛋白单克隆抗体 AFP, Alexa Fluor 750 conjugated
结蛋白样蛋白CGNL1抗体 CGNL1
巨噬细胞甘露糖受体 (CD206) 抗体 MRC1
SLAMF6抗体 SLAMF6/LY108
TNRC18蛋白抗体 TNRC18
透明质酸及粘蛋白2抗体 HAPLN2
晚期糖基化终产物受体1抗体 DDOST
G蛋白偶联受体80抗体 OXGR1/GPR80
Hermansky-Pudlak综合征蛋白5抗体 HPS5
鸟嘌呤核苷酸交换因子GEFT抗体 GEFT
平滑肌肌球蛋白重链抗体 smooth muscle Myosin heavy chain 11
非霍奇金瘤蛋白抗体 RTEL1
富含亮氨酸重复蛋白10抗体 LRRC10
乙醛脱氢酶1蛋白家族L1重组兔单克隆抗体 ALDH1L1
造血转录因子PU.1抗体 PU.1/Spi1
即用型SP组化试剂盒 1盒300张片
小鼠结膜上皮细胞Rabbit Anti-Mink IgG H&L / PE-Cy3
尤文氏肉瘤相关EWS蛋白抗体
hTRF1 AS; NIMA interacting protein 2; NIMA-interacting protein 2; PIN 2; PIN2; t TRF1; Telomeric protein Pin2; Telomeric protein Pin2/TRF1; Telomeric repeat binding factor (NIMA interacting) 1; Telomeric repeat binding factor 1; Telomeric repeat binding protein 1; Telomeric repeat-binding factor 1; TERF 1; TERF1; TERF1_HUMAN; TRBF 1; TRBF1; TRF 1; TRF; TTAGGG repeat binding factor 1; TTAGGG repeat-binding factor 1.
小鼠结膜上皮细胞
大鼠脐静脉内皮细胞
COR-L23/CPR人非小细胞肺癌细胞
果蝇胚胎细胞;S2
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;