实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
颈静脉存在于脊椎动物颈部的静脉。血管内皮细胞层是血液和其它组织的天然屏障。内皮细胞同时会合成和分泌凝血和纤维蛋白溶解系统的增强和抑制物，以及影响血小板粘附和聚集的媒介物。它们同时也会分泌控制细胞增殖的蛋白来维持血管壁的健康。
内皮细胞会分泌 t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及响应TNF-α，继而分泌细胞因子GM-CSF，表达ICAM-1表面抗体，产生大量的一氧化氮和endothelin。原代静脉内皮细胞的体外培养系统有助于在特定的体外条件下研究血管内皮细胞的功能。
组织来源
产品规格
货号
用途
颈静脉组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1793
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）或血管假性血友病因子（vWF）荧光染色为阳性。
3）经鉴定细胞纯度高于90%。
4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5）细胞生长方式：梭形，多角形细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代内皮细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品：
酒类氨一步法定量检测试剂盒
细胞甘油激酶（Glycerol kinase）活性酶连续反应比色法定量检测试剂盒
人白介素22(IL-22)elisa分析检测试剂盒
大鼠丙二酸单酰辅酶A脱羧酶(MLYCD)elisa分析检测试剂盒
小鼠血管**素1(ANG-1)elisa检测试剂盒
组织RSK3激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
人基质金属蛋白酶-9（MMP-9）elisa检测试剂盒
大鼠肌**抑制素(MSTN)elisa检测试剂盒
猪α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa分析检测试剂盒
热休克蛋白70家族13抗体 STCH/HSPA13
溶血磷脂酸受体蛋白2/EDG4抗体 LPA2
IWS1蛋白抗体 IWS1
KIAA1731蛋白抗体 KIAA1731
真核翻译起始因子4B单克隆抗体 EIF4B
植烷酰辅酶A羟化酶2相互作用蛋白抗体 PHYHIP
钙调蛋白激酶CaMK1D抗体 CAMK1D
肝细胞粘附分子抗体 HEPACAM
细胞色素P450 4Z1抗体 CYP4Z1
细胞周期调控因子34 CDC34
ZDHHC6蛋白抗体 ZDHHC6
β葡萄糖醛酸苷酶抗体 beta glucuronidase
ASMTL蛋白抗体 ASMTL
BEN结构域蛋白5抗体 BEND5
跨膜蛋白SEMA4A抗体 SEMA4A
磷酸二酯酶4A抗体 PDE4A
小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa检测试剂盒
小鼠颈静脉内皮细胞Rat LDL-IC ELISA Kit
山羊白介素1β(IL-1β)elisa分析检测试剂盒
Fanconi Anemia Complementation Group F; FACF; FAF; Fanconi anemia group F protein; MGC126856; Protein FACF; FANCF_HUMAN.
小鼠颈静脉内皮细胞
大鼠脾源性内皮祖细胞
ECC12人胃癌细胞
其它
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；