实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
脑血管周细胞分布于脑组织的微血管系统中,调节血管形成、稳定和功能的关键因素。周细胞典型的特征是有一个突出的核,核周围胞浆较少,有许多平行于微血管长轴的突起,这些突起逐渐变细并包绕微血管腔,起到对管腔的支持作用。
同时,一个周细胞可以通过伸展的突起与微循环中的多个接触。此外,周细胞和内皮细胞间的相互作用在血管新生中具有极为重要的作用。
组织来源
产品规格
货号
用途
脑组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1945
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常脑组织。
2)细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf 原代 周 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
人P0蛋白抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒
桩蛋白抗体
Leupaxin
羧肽酶X(M14家族2)抗体
CPXM2
植物钠/钾ATP酶(Na+/K+ -ATPase)活性比色法定量检测试剂盒
人髓样分化蛋白-2(MD-2)elisa检测试剂盒
大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)elisa检测试剂盒
猪三碘甲状腺原氨酸(T3)elisa检测试剂盒
P53诱导细胞凋亡抑制蛋白α抗体
NME6
GRAMD1B蛋白抗体
GRAMD1B
转录因子E2F二聚体蛋白2抗体 Anti-TFDP2/DP2
磷酸化蛋白激酶R抗体 Anti-Phospho-PKR (Thr446/451)
多聚合酶g抗体 Anti-PAPOG
核转录因子SOX4抗体 Anti-SOX4
磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体
phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase beta (Ser220)
嗅觉受体52N4抗体
OR52N4
WDFY3蛋白抗体 Anti-WDFY3
NOGO相互作用线粒体蛋白1抗体 Anti-NIMP/RTN4IP1
环指蛋白19B抗体 Anti-RNF19B
SCN2A抗体 Anti-SCN2A
大鼠γ-氨基丁酸受体亚基α1(GABRA1)elisa分析检测试剂盒
小鼠脑血管周细胞小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa检测试剂盒
大鼠游离三碘甲状腺原氨酸(fT3)elisa检测试剂盒
Calponin homology domain-containing protein 1; CHDC1; KIAA1016; Leucine-rich repeat and calponin homology domain-containing protein 1 antibody Lrch1; LRCH1_HUMAN; Neuronal protein 81; NP81.
小鼠脑血管周细胞
大鼠脑血管成纤维细胞
HEY人**别浆液性卵巢癌细胞
人肺癌细胞;NCI-H3255
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;