实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
膀胱壁由三层组织组成,由内外为粘膜层、肌层和外膜。其中,粘膜层为极薄的一层移行上皮组织,和输尿管及尿道黏膜彼此连贯。体外培养膀胱上皮细胞不仅为组织工程膀胱,尿道提供种植细胞的必要手段,也是研究移行上皮细胞肿瘤发生和的基础与前提。
组织来源
产品规格
货号
用途
膀胱组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1839
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常膀胱组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代 上皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品:
小鼠多聚球蛋白受体(PIGR)elisa检测试剂盒
山羊Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)elisa分析检测试剂盒
发酵液丙三醇比色法定量检测试剂盒
猪磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)elisa检测试剂盒
大鼠血红素氧合酶2(HO2)elisa检测试剂盒
谷氨酰胺酶(GLS)测试盒
人体c-Ki-ras RFLP基因分析试剂盒
小鼠成纤维细胞生长因子8(FGF8)elisa分析检测试剂盒
大鼠CD44分子(CD44)elisa分析检测试剂盒
脂肪细胞增强结合蛋白1抗体 AEBP1
肿瘤坏死因子配体超家族成员13B抗体 TNFSF13B
肝黄素单加氧酶2抗体 FMO2
高迁移率族蛋白2重组兔单克隆抗体 HMGB2
KIAA1276蛋白抗体 KIAA1276
LSM14A蛋白抗体 LSM14A/C19orf13
醛缩酶C抗体 Aldolase C
人类缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp36抗体 HIV2 gp36
BCL2相关蛋白A1重组兔单克隆抗体 BCL2A1
CD19抗体 CD19
激酶受体A抗体 TrkA
磷酸二酯酶6β抗体 PDE6B
β分泌酶抗体 BACE1
氨基己糖苷酶D抗体 HEXDC
细胞色素B561结构域蛋白1抗体 CYB561D1
线粒体核糖体蛋白S31抗体 MRPS31
大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)elisa分析检测试剂盒
小鼠膀胱上皮细胞Goat Anti-Human IgG H&L / PE-Cy3
锌指蛋白200抗体
Amphiglycan; Amphiglycan; MGC22217; OTTHUMP; ryudocan amphiglycan; Ryudocan; Ryudocan core protein; Ryudocan core protein; SDC 4; SDC4; SDC4_HUMAN; SYND 4; SYND4; syndecan 4; syndecan 4 (amphiglycan, ryudocan); syndecan proteoglycan 4; Syndecan-4; Syndecan4.
小鼠膀胱上皮细胞
大鼠脑动脉血管内皮细胞
HOP-92人非小细胞肺癌细胞
人肝内胆管上皮细胞永生化;HIBEpiCs-SV40T
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;