实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
脾是重要的器官，有造血、滤血、衰老血细胞及参与反应等功能。也是细胞迁移和接受抗原刺激后发生应到、产生效应分子的重要场所。脾基质细胞是脾脏中结缔组织细胞，起到为脾脏中实质细胞提供支持和营养的作用。
组织来源
产品规格
货号
用途
脾脏组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1934
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）组织来源于实验动物的正常脾脏组织。
2)细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代基质细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品：
大鼠葡萄糖激酶(GK)elisa检测试剂盒
大鼠白介素5（IL－5）elisa检测试剂盒
小鼠凝血因子Ⅷ(F8)elisa检测试剂盒
人CD19分子(CD19)elisa分析检测试剂盒
细胞基质金属（MMP-2）琥珀酰明胶法比色定量检测试剂盒
大鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子 uPA elisa检测试剂盒
人体血小板粗提分离试剂盒
土壤羟胺还原酶（HR）测试盒
通用型密执岁棍状杆菌棋盘亚种Clavibacter michiganensis subsp. Tessellarius；CMT）基因检测试剂盒
锌指蛋白537抗体 ZNF537
锌指蛋白835抗体 ZNF835
层粘连蛋白B2γ1抗体 Laminin B2 gamma 1
次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1单克隆抗体 HPRT1
DPM1蛋白抗体 DPM1
ELAVL1抗体 ELAVL1
磷酸化激酶C-SRC抗体 phospho-CSK (Ser364)
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2重组兔单克隆抗体 Phospho-MEK1/2 (Ser218 + Ser222)
组蛋白H3K9甲基转移酶4抗体 SETDB1/KMT1E
12号染色体开放阅读框24抗体 C12ORF24
黑色素瘤硫酸软骨素蛋白多糖4抗体 NG2
环指蛋白156抗体 RNF156
PDLIM2蛋白抗体 PDLIM2
PerCP-Cy5.5标记人HLA-DR单克隆抗体 human HLA-DR/PerCP-Cy5.5
神经细胞特异性转录因子LDB1抗体 LDB1
双甲基精氨酸水解酶2抗体 DDAH2
冰冻切片制片预处理脱水液
小鼠脾基质细胞Rabbit Anti-Human IgM / Cy5
神经细胞突触蛋白PCLO抗体
Protein S100 A13; S100 calcium binding protein A13; S10AD_HUMAN; Protein S100-A13; S100 calcium-binding protein A13; S100a13.
小鼠脾基质细胞
大鼠毛囊干细胞
Hs 839.T人黑色素瘤细胞
人高转移卵巢癌细胞；HO-8910PM
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；