实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
乳腺导管位于胸部的皮下组织中,是的主要构成组织之一,也是乳汁的排泄管道。乳腺管的主要功能是乳汁的排泄和储存每个乳腺叶都有一个输乳管,输乳管会在近处形成膨大的输入管窦,末端变细并开口于。
乳腺被结缔组织分隔为 15-25个 叶,每个叶又分为若干小叶,每个小叶是一个复管泡状腺。腺泡上皮为单层立方或柱状,导管包括小叶内导管、上间导管和总导管。小叶内导管多为单层柱状或立方上皮,小叶间导管为复层柱状上皮,总导管又称输乳管,开口于,管壁为复层扁平上皮,下表皮相续。
组织来源
产品规格
货号
用途
乳腺组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1890
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)细胞来源于实验动物正常乳腺组织。
2)细胞鉴定:细胞角蛋白(PCK)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代 上皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品:
小鼠前列腺素E2(PGE-2)elisa检测试剂盒
小鼠Wolfram综合征蛋白1(WFS1)elisa检测试剂盒
位素RNA北方杂交试剂盒
细胞P38蛋白表达荧光定量检测试剂盒
谷氨酸脱氢酶GDH测试盒 50T/48样 紫外比色法
组织组蛋白乙酰转移酶(HAT)总活性荧光定量检测试剂盒
人转化生长因子β受体2(TGFβR2)elisa检测试剂盒
大鼠抗IVIgG抗体elisa分析检测试剂盒
DMEM细胞培养基(无酚红)
色氨酸羟化酶抗体 TPH
神经肽Y受体5抗体 NPY5R
MOB4A蛋白抗体 MOB4A
NDUFB9蛋白抗体 NDUFB9
周期素依赖性激酶3抗体 CDK3
转录调控激活蛋白SNF5抗体 SNF5
谷氧还蛋白/巯基转移酶抗体 Glutaredoxin 1
海藻酸钠抗体 Sodium alginate
腺嘌呤核苷酸转运蛋白1、2、3、4抗体 ANT1+ANT2+ANT3+ANT4
锌指蛋白177抗体 ZNF177
白细胞介素28受体α抗体 IL28 Receptor alpha
苯丙氨酸羟化酶4抗体 PAH
Cervical cancer oncogene 3/宫颈癌原癌基因3抗体 FUNDC2
DHX15蛋白抗体 DHX15
磷酸化p21激活激酶1抗体 phospho-PAK1 (Ser204)
磷酸化磷脂酰肌醇激酶p85β抗体 phospho-PIK3R2 (Tyr467)
大鼠心肌肌钙蛋白T(cTn-T)elisa检测试剂盒
小鼠乳腺导管上皮细胞Mouse Anti-Goat IgG H&L ascites
锌指蛋白415抗体
Chromosome 18 open reading frame 54; Hypothetical protein LOC162681; LAS2; Lung adenoma susceptibility protein 2; MGC33382; Uncharacterized protein C18orf54; LAS2_HUMAN.
小鼠乳腺导管上皮细胞
大鼠卵巢内膜细胞
Huh7.5人肝癌细胞
人滑膜肉瘤细胞; SW 982 (STR)
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;