实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
集合管是由皮质走向髓质椎体孔的小管,沿途有许多肾单位的远曲小管与之相连,管径逐渐变粗,管壁逐渐变厚,管壁由柱状上皮构成。
集合管流的是小管液,肾脏血液经肾小球滤过,形成的原尿,进入肾小管后就称为小管液,小管液流向集合管进一步滤过和重吸收形成终尿。
组织来源
产品规格
货号
用途
肾脏组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1847
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常肾脏组织。
2)细胞鉴定:细胞角蛋白-18(CK-18)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 上皮 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
GR-βELISAKit
大鼠促性腺释放受体(GnRHR)elisa分析检测试剂盒
GnRHR ELISA Kit
人胶转蛋白(TAGLN)elisa分析检测试剂盒
HumanTAGLNELISAKit
微管相关蛋白α6抗体 Anti-Tubulin alpha 6/TUBA1C
认知缺陷突触相关蛋白SynGAP抗体 Anti-RASA1/SynGAP
巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体 Anti-Nestin
血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体 Anti-VWF
睾酮(T)elisa分析检测试剂盒
Elephant Testosterone(T)ELISA kit
人大肠癌专一抗原4(CCSA-4)elisa分析检测试剂盒
CCSA-4ELISAkit
大鼠抗链球菌溶血素O抗体(IgG)elisa检测试剂盒
细胞脂质溶解比色法定量检测试剂盒
雌二醇(E2)elisa分析检测试剂盒
细胞总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒
NACA2蛋白抗体
NACA2
ZNF792/锌指蛋白792抗体
FLJ38451
先心病相关蛋白TBX1抗体 Anti-TBX1/Brachyury
磷酸化磷酯酶Cγ2抗体 Anti-Phospho-PLC gamma 2(Tyr753)
锌指蛋白339抗体 Anti-OVOL2/ZNF339
炎症负调控因子蛋白抗体 Anti-SELS
PE-Cy7标记的兔抗牛IgG H&L
小鼠肾集合管上皮细胞LN ELISA kit
人甲基化DNA[蛋白]半胱氨酸S甲基转移酶elisa分析检测试剂盒
20S Proteasome α2; HC3; Macropain subunit C3; MU antibody Multicatalytic endopeptidase complex subunit C3; PMSA2; Proteasome (prosome macropain) subunit alpha type 2; Proteasome alpha 2 subunit; Proteasome component C3; Proteasome subunit alpha type 2; Proteasome subunit alpha type-2; Proteasome subunit HC3; PSC2; PSC3; PSMA 2; psmA2; PSA2_HUMAN.
小鼠肾集合管上皮细胞
大鼠口腔黏膜上皮细胞
IM95m胃癌细胞
人甲状腺癌细胞; HTh-7 (STR)
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;