实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
输尿管位于腹膜后,为一肌肉粘膜所组成管状结构,上起自肾盂,下终止于膀胱三角。输尿管管壁分为 4层:黏膜表面、固有层、输尿管肌层和外膜。其中,肌层主要由内纵和外环两层平滑肌组成。
组织来源
产品规格
货号
用途
输尿管组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1838
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常输尿管组织。
2)细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代 平滑肌 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品:
大鼠总胆汁酸(TBA)elisa检测试剂盒
大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)elisa检测试剂盒
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大鼠巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)elisa检测试剂盒
PCR扩增检测试剂盒
肾细胞癌抗原NYREN 45抗体 KCTD3
嗜酸乳杆菌假定蛋白 Lactobacillus acidophilus hypothetical protein
OPA1L蛋白抗体 OPA1L
PE-Cy5标记人CD107a单克隆抗体 human CD107b/PE-Cy5
转移相关蛋白MTA3抗体 MTA3
组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶2B抗体 KMT2B
核酸内切酶8样蛋白2抗体 NEIL2
黑色素瘤相关抗原C1抗体 MAGEC1
锌指蛋白516抗体 ZNF516
锌指蛋白826抗体 ZNF826
层粘蛋白α1抗体 Laminin alpha 1
雌调节基因1抗体 CUZD1
DOCK9蛋白抗体 DOCK9
eIF4E结合蛋白抗体 eIF4EBP1
磷酸化蛋白激酶受体B1+B2抗体 phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594)
磷酸化转录因子MYB相关蛋白B抗体 phospho-MYBL2 (Thr487)
酵母多酚氧化酶(polyphenol oxidase;PPO)活性比色法定量检测试剂盒
小鼠输尿管平滑肌细胞Rabbit Anti-Monkey IgM / HRP
神经丛蛋白A2抗体
Hypothetical protein LOC9907; KIAA0415; Uncharacterized protein KIAA0415; AP5Z1_HUMAN.
小鼠输尿管平滑肌细胞
大鼠结肠成纤维细胞
KMS-34人多发性骨髓瘤细胞
人类甲状腺未分化癌; 8305C (STR)
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;