实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
嗅球是脊椎动物前脑结构中参与嗅觉的部分,用于感知气味。嗅球可分两个不同结构:主嗅球与辅助嗅球。
神经干细胞是存在于哺乳动物体内的一种具有多向分化潜能和自我更新能力的细胞,能分化为神经元和神经胶质细胞,其在神经系统中的替代前景广阔。
组织来源
产品规格
货号
用途
嗅球组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1967
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常嗅球组织。
2)细胞鉴定:Nestin荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:集落,克隆球状,半贴壁半悬浮培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 神经干 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
sPLA2ELISAKit
驴雌二醇(E2)elisa分析检测试剂盒
E2 ELISA Kit
人的牛血清白蛋白(BSA)elisa分析检测试剂盒
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驴黄体**素(LH)elisa检测试剂盒免费代测
石蜡切片总舒尔茨间接染色试剂盒
小鼠环磷酸腺苷(cAMP)elisa分析检测试剂盒
大鼠半乳糖凝集素7(GAL7)elisa检测试剂盒
JNK/ SAPK抑制激酶抗体
JIK/TAOK3
羧肽酶CPO抗体
Carboxypeptidase O
大鼠白蛋白elisa检测试剂盒
小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)elisa分析检测试剂盒
人Toll样受体6(TLR6)elisa分析检测试剂盒
组织蛋白磷酸酶2A (PP2A)活性比色法定量检测试剂盒
RNA结合蛋白26抗体
RBM26
成纤维细胞生长因子样蛋白1抗体
KGFLP1
等上游刺激因子1抗体 Anti-USF-1
原钙粘蛋白γA2抗体 Anti-PCDHGA2
原钙粘附蛋白α8抗体 Anti-PCDHA8
尿酸酶 Anti-Uricase
Cy5.5标记的羊抗小鼠IgG H&L
小鼠嗅球神经干细胞Mouse Anti-Goat IgG H&L / PE-Cy7
微管卷曲蛋白SYNC抗体
HDL.
小鼠嗅球神经干细胞
大鼠海绵体平滑肌细胞
LP-1人多发性骨髓瘤细胞
人皮肤成纤维细胞(国内建系永生化处理);HDF-SV40T
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;