实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
微血管内皮细胞受损已被视为创伤、感染、休克、肿瘤、血管等多种和综合症发展的病理基础。一旦微血管内皮细胞受损,必然影响甚至破坏微血管内皮细胞正常的生物学功能,引起多种的发生。
微血管内皮细胞间连接与血管通透性有着非常密切的关系。微血管内皮细胞合成与分泌前列环素、一氧化氮、内皮源性超极化因子和内皮素等物质,来维持血管的正常状态。
组织来源
产品规格
货号
用途
脂肪组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1905
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常脂肪组织。
2)细胞鉴定:血管假性血友病因子(vWF)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代 内皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品:
谷草转氨酶(GOT)测试盒
大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)elisa检测试剂盒
猪1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)elisa分析检测试剂盒
人黑色素瘤活性抑制蛋白(MIA)elisa分析检测试剂盒
隐孢子虫(Cryptosporidium)涂片吉姆莎(Giemsa)染色试剂盒
组织及血液酸性磷酸酶(ACP)测试盒
石蜡切片组织CASPASE-2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)elisa分析检测试剂盒
5’核苷酸酶EC3.1.3.5 1 KU/瓶
抑制素βB/Inhibin β B抗体 Inhibin beta B
原钙粘附蛋白α8抗体 PCDHA8
范可尼综合征相关蛋白FAN1抗体 FAN1
辅酶生物合成单加氧酶COQ6抗体 COQ6
G蛋白偶联受体135/松弛素受体3抗体 Relaxin 3 receptor 1
G蛋白信号转导调节因子7抗体 RGS7
内吞作用辅助蛋白EPN1抗体 Epsin 1
膀胱癌缺失基因1抗体 BRINP1
AF680标记的神经元核抗原抗体 NeuN, Alexa Flour 680 conjugated
AF750标记的肿瘤坏死因子-α抗体 TNF alpha, Alexa Flour 750 conjugated
紧密连接蛋白3抗体 Claudin 3
卷曲螺旋结构域蛋白129抗体 CCDC129
SRPX2蛋白抗体 SRPX2
TRIM45蛋白抗体 TRIM45
突触相关蛋白23抗体 SNAP23
细胞表面球蛋白样转录因子2抗体 LILRB1
细胞糖原磷酸化酶激酶(GLYCOGEN PHOSPHORYLASE KINASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒
小鼠脂肪微血管内皮细胞小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa分析检测试剂盒
大鼠载脂蛋白A1(Apo-A1)elisa检测试剂盒
6-bisphosphatase 1; 6-bisphosphate 1-phosphohydrolase 1; D fructose 1 6 bisphosphate 1 phosphohydrolase 1; D-fructose-1; EC 3.1.3.11; F16P1_HUMAN; FBP; FBP 1; FBP1; FBPase 1; Fructose 1 6 bisphosphatase 1; Fructose bisphosphatase 1; Fructose-1; Growth inhibiting protein 17; Liver fructose bisphosphatase.
小鼠脂肪微血管内皮细胞
大鼠冠状动脉平滑肌细胞
LS513人直肠癌细胞
人前列腺癌细胞;LAPC4
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;