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分光光度计实验原理

一、实验目的
　　1.学习紫外分光光度计法测定蛋白质含量的原理。 2.掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。 3.掌握TU-1901紫外-能见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。
　　二、实验原理
　　1.紫外-能见分光光度法，是以溶液中物质的分子或离子对紫外和能见光谱区辐射能的选择性吸取为基础而建立起来的一类分析方法。
　　紫外光：10-400 nm
　　能见光：400-780 nm(可被人们的眼睛所感觉)
　　特点：带光谱、分子光谱
　　应用：定性分析-*大吸取波长；定量分析-朗伯-比尔定律(标准曲线法和标准加入法) a.定性分析原理：
　　吸取曲线：吸取峰的数目、位置、相对强度以及吸取峰的形状。
　　b.定量分析原理：
　　根据朗伯-比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
　　定量分析常用的方法是标准曲线法即只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。

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