大米中淀粉含量的测定
一、原理
本法是根据GB/T5009.9-2003酸水解法和改良快速直接滴定法进行测定的。
试样经除去脂肪及可溶性糖后，其中的淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原性单糖的方法测定，并折算成淀粉。
二、仪器与试剂
水浴锅 粉碎机 40目筛 附250mL锥形瓶的回流装置 台称 电炉 锥形瓶 烧杯 量筒 容量瓶 移液管 棕色酸式滴定管 手套
乙醚 乙醇(85%) 盐酸(1+1) NaOH溶液(400g/L) NaOH溶液(100g/L) 乙酸铅溶液（200g/L） 硫酸钠溶液(100g/L) 甲基红溶液(2g/L,用乙醇配)
0.01mol/L KMnO4标准溶液
裴林氏A液：溶解CuSO4·5H2O 35g 及亚甲基蓝0.05g，加水溶解，定容至1000mL，摇匀。
裴林氏B液：称取117g酒石酸钾钠，126.4g 氢氧化钠，9.4g亚铁***溶解后，定容至1000mL,摇匀。
0 .1% 标准葡萄糖溶液：取分析纯葡萄糖，在150℃下烘干至恒重，准确称取1.000g无水葡萄糖，加水溶解后定容至1000mL。
三、测定步骤
1、样品处理
将大米磨碎并过40目筛，称取3.00g米粉置于放有慢速滤纸的漏斗中，用30mL乙醚分三次洗去试样中脂肪，弃去乙醚。用150mL85%乙醇分数次洗涤残渣，除可溶性糖。滤干乙醇溶液，以100mL水洗涤漏斗中残渣并转移至250mL锥形瓶中，加入30mL(1+1)盐酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h。回流完毕后，立即置流水中冷却。待试样水解液冷却后，加2滴甲基红溶液，先以NaOH溶液(400g/L)调至黄色，再以盐酸（1+1）校正至水解液刚变为红色为宜。然后加20mL乙酸铅溶液（200g/L），摇匀，放置10min，再20mL硫酸钠溶液(100g/L)，以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液和残渣转入500mL容量瓶中，加入水稀释至刻度。过滤，弃去初滤液20mL，滤液供测定用。
2、裴林氏液的标定（空白滴定）：
1>预备滴定:准确吸取裴林氏A、B液各5mL于锥形瓶中,加水10mL,摇匀。在电炉上加热2分钟内至沸腾，沸腾后立即由滴定管滴入标准葡萄糖溶液至终点（由蓝色变为淡黄色），记下消耗的体积。
2>正式滴定:准确吸取裴林氏A、B液各5mL于锥形瓶中,加水10mL,预加比预备滴定少0.5-1mL的标准葡萄糖溶液，摇匀。在电炉上加热2分钟内至沸腾，沸腾后立即由滴定管以逐滴的速度滴入标准葡萄糖溶液至终点，记下消耗的体积。
3、大米水解液中淀粉的测定
1>预备滴定:准确吸取裴林氏A、B液各5mL于锥形瓶中,加水10mL,加大米水解液10.00mL，摇匀。在电炉上加热2分钟内至沸腾，沸腾后立即由滴定管滴入标准葡萄糖溶液至终点，记下消耗的体积。
2>正式滴定:准确吸取裴林氏A、B液各5mL于锥形瓶中,加水10mL,加大米水解液10.00mL，预加比预备滴定少0.5-1mL的标准葡萄糖溶液，摇匀。在电炉上加热2分钟内至沸腾，沸腾后立即由滴定管以逐滴的速度滴入标准葡萄糖溶液至终点，记下消耗的体积。
四、计算
还原糖%=
V0—空白正式滴定消耗的标准葡萄糖溶液，mL
V1—样品正式滴定消耗的标准葡萄糖溶液，mL
W—硬糖的质量，g
V2—测定时吸取的样液体积，mL
500—大米水解液总体积，mL
0.9—还原糖(以葡萄糖计)折算成淀粉的换算系数
实验十一 维生素C（抗坏血酸）的测定——2，6-二氯靛酚滴定法
1、原理：
维生素C是一种已糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以被人们称做抗坏血酸，主要为还原型及脱氢型两种。还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含抗坏血酸的量成正比。
2、试剂
⑴ 1%草酸溶液：
⑵ 2%草酸溶液：
⑶抗坏血酸标准液：准确称20mg抗坏血酸溶于1%草酸中，并稀释至100ml，吸5ml于50ml容量瓶中，加入1%草酸至刻度，此溶液每毫升含有0.02mg抗坏血酸；
⑷ 0.02% 2，6-二氯靛酚溶液：称取2，6-二氯靛酚50mg，溶于200ml含有52mg碳酸氢钠的热水中，冷却后，稀释至250ml，过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内，应用过程中每星期标定一次。
⑸ 0.001 mol/LKIO3标液：吸0.1 mol/LKIO3溶液5ml→于500ml容量瓶内→加水至刻度，每毫升相当于抗坏血酸0.008mg；
⑹ 0.5%淀粉溶液；
⑺ 6%KI溶液；
3．溶液的标定
（1）抗坏血酸溶液的标定
吸取抗坏血酸标准溶液5ml于三角瓶→加6%KI溶液0.5ml→加1%淀粉3滴→用0.001mol/LKIO3标液滴定到淡蓝色。
计算：抗坏血酸浓度c（mg/ml）= （V1×0.088）/ V2
V1——滴定时消耗0.001mol/LKIO3标准溶液的体积（ml）
V2——滴定是时所取抗坏血酸的体积（ml）
0.088 ——1ml0.001 mol/L KIO3标液相当于抗坏血酸的量（mg/ml）
（2）2，6-二氯靛酚溶液标定：吸5ml已知浓度抗坏血酸溶液标准溶液→加5ml1%草酸→用染料2，6-二氯靛酚滴定至溶液呈粉红色，在15秒不褪色为终点。
计算：每毫升2，6-二氯靛酚相当于抗坏血酸的��克数等于滴定度（T）
T=
C ——抗坏血酸的浓度（mg/ml）
V1——抗坏血酸标准溶液的体积（ml）
V2——消耗2，6-二氯靛酚的体积（ml）
4．操作方法
⑴提取：称样50g→加2%草酸100ml→到入捣碎机中→处理→过滤→颜色若深可加白陶土
⑵滴定：吸5ml样液→于三角瓶→用染料滴定至粉红色→15秒内不褪色。
计算：
抗坏血酸（mg/100g）=（V × T）/ W × 100
V ——消耗染料体积（ml）
T ——1ml染料所能氧化抗坏血酸的毫克数
W——滴定时所有滤液中含有样品的克数
5．注意事项
⑴靛酚法测定的是还原型抗坏血酸，方法简便，较灵敏，但特异性差，样品中的其他还原性物质（如Fe2+、Sn2+、Cu2+等）会干扰测定，使测定结果偏高。
⑵所有试剂的配制*好都用重蒸馏水；
⑶样品进入实验室后，应浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，损失维生素C；贮存过久的罐头食品，可能含有大量的低铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。这时如用草酸，低铁离子可以还原2，6-二氯靛酚，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况的发生；
⑷整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；
⑸在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；
⑹测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。
