Waters LC-MS日常使用规范
一、 开机
1、 开机前应观察液氮罐的分压表的压力在0.5-0.7 MPa间,氩气在0.05-0.1MPa间。
2、 开机顺序:电脑-进样器电源(连续使用时可以不关电源)-进入工作站Masslynx-其它部分电源。(特别注意:质谱电源短期内不关)。
3、 打开氮气-press for operate,设定Source Temp和Desolvation Temp,等待Desolvation Temp达到300℃后-开UPLC泵,平衡系统。
4、 分别编辑UPLC(Inlet)和MS(MS Tune和MS Method)方法。
5、 设定流动相为梯度的初始比例(新换流动相时,要将相应的管路prime),增加流速至0.1 mL/min,待压力稳定后,增加流速到0.2 mL/min,加载Inlet Method,平衡色谱柱,一般5 min即可。(使用APCI源时,流速要缓慢增加到0.8 ml/min。)
6、 要确认样品盘和样品瓶的位置正确(用手拉托盘,位置正确时,托盘拉不动),样品瓶的必须盖盖。自动进样时,不要开启进样门。创建样品表:
7、 应注意的系统参数:
UPLC:柱压≤15000 psi;
TUV检测器:选择波长,扫描次数(single模式时一般为10点/second)。
MS:真空度:开Ar前,1.0×10-4;开Ar后,3.0-5.0×10-4。
8、 Source Temp, Desolvation Temp和柱温达到设定值,柱压波动小于20 psi,可以进样。
二、 关机
1、 清洗源:缓慢停止UPLC泵,然后将流动相改为90 %的乙腈,缓慢增加流速至0.2 ml/min,冲洗20 min。
2、 冲洗色谱柱:断开UPLC和MS,用乙腈(A1)0.2 ml/min冲洗10 min。
3、 冲洗色谱柱过程中:关闭Ar-关闭高压(Press for standby)-设定Source Temp为60℃-待Desolvation Temp将到50℃下后-关闭N2-关闭液氮瓶上的增压阀。
4、 不用关闭软件和电脑,只关闭电脑显示器。
<Waters LC-MS日常使用规范>
注 意 事 项
1、 实验室温度应保持在18-22℃。不要尝试改变空调设置!
2、 注意清洁卫生。每日实验结束后,打扫仪器室桌面与地面,保持实验室整洁。
3、 每日实验结束后,记录当天的仪器使用情况于仪器使用记录本上,包括仪器使用起止时间与出现问题的解决方案,并签上操作者的名字。
4、 UPLC共有7个液体管路,分别为:A1、A2、B1、B2、强洗液(SNW)、弱洗液(WNW)和SW,使用前应查看相应体积,以便及时添加。另更换试剂时要对相应的管路进行prime。
常用:A1:乙腈;A2 :甲醇;
B1 :根据流动相配制;B2:90 %乙腈;
强洗液(SNW):90 %乙腈;
弱洗液(WNW)和SW:10 %乙腈或流动相的初始比例。
水相应每天更换。
5、 流动相不能使用盐和其它不挥发性物质,如磷酸等。常用的流动相调节剂有甲酸、醋酸和氨水等。
6、 样品处理方法:过0.22 μm滤膜或高速离心。
7、 整个实验结束后,自动进样瓶,针泵进样瓶用水冲洗干净后用洗液浸泡10分钟,再用蒸馏水冲洗,烘干后送回质谱室。自动进样瓶小盖不能用洗液清洗,浸泡于蒸馏水中,超声30 min,晾干。所有容器都不能用洗洁精清洗!
8、 质谱室的电脑禁止插U盘、光盘和软盘,禁止安装任何软件,只能输出不能输入,输出实验数据时,应使用刻录光盘。
9、 每周用甲醇-水(50:50)清洗**锥孔。
10、 使用ESI源时,流速在0.2-0.3 mL/min, 每周打开机械泵上的旋钮一次, 振气20 min。
11、 使用APCI源时,流速在0.8 mL/min左右,每天振气20 min。