人白介素2受体(IL-2R)ELISA Kit

产品【人白介素2受体(IL-2R)ELISA Kit 】资料
如您有需要该款产品，请与我们联系。


产品名称：人白介素2受体(IL-2R)ELISA Kit
包  装：48T/96T
检测方法：ELISA酶联**(双抗夹心法)
检测标本：血清、血浆、组织、细胞上清液、尿液等



人白介素2受体(IL-2R)ELISA Kit 的详细说明：


本公司提供各种种属各种系列ELISAkit酶联**检测试剂盒。 主要用于科研方面，不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。

主要品牌：R&D , RB,DSL, GBD, ADL, ADI, R&D,分装，RB分装，拜发，等

主要分为以下系列：1.细胞因子检测试剂盒 2.***检测试剂盒 3.肝纤维化检测试剂盒 4.心肌梗塞检测试剂盒 5.肿瘤标志物检测试剂盒 6.自身**检测试剂盒 7.优生优育检测试剂盒 8.传染病检测试剂盒 等等；

各种种属有：人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊；植物。

标本齐全：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水等等；

有售出产品保证产品质量,提供完善售后服务.

联系人：马先生

电话：021 64855665  54261506

传真：021 54261506

联系电话：

邮箱： solarbio@126.com

地址：上海市徐汇区钦江路15号14层

48T/96T

ELISA试剂盒

目前公司已经和Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf、Fluka、Hyclone、Merck、Millipore、Omega、Oxoid、Pall、Peprotech、Pharmacia、Pierce、Roche、Sigma、Serva、TBD、Whatman , R&D ,MI , ADI等有名企业结成紧密的合作伙伴关系，代理其**世界的**产品，并在国内各地设有分销机构。

1.        酶联板：一块(96孔)

2.        标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1,600 pg/ml，将其稀释为400 pg/ml后，再做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)，分别稀释成400 pg/ml，200 pg/ml，100 pg/ml，50 pg/ml，25 pg/ml，12.5 pg/ml，6.25 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。如配制200 pg/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3.        样品稀释液：1×20ml。

4.        检测稀释液A：1×10ml。

5.        检测稀释液B：1×10ml。

6.        检测溶液A：1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

7.        检测溶液B：1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。

8.        底物溶液：1×10ml/瓶。

9.        浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10.    终止液：1×10ml/瓶(2N H₂SO4)。

11.    覆膜：5张

12.    使用说明书：1份

 

1.   酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)

2.   微量加液器及吸头，EP管

3.   蒸馏水或去离子水，全新滤纸

 

1.        血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.        血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.        其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

4.        样本处理：血清或血浆标本推荐稀释5,000倍。

 

实验开始前，各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解)；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制)，酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止)。

7.        依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.        用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。

 

注：

1.  试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。

2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，**个孔与*后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)*好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。

3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响*后的酶标仪读数。

5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请**配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。

6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。

    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请*后乘以稀释倍数。

 

1.  手工洗板方法：吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。

2.  自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

 

  以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标)，OD值为横坐标(对数坐标)，在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如curve expert 1.3，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

 

 

购买本公司目录任何一种检测试剂盒，都可提供代检测服务，您只需将需要检测的动物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)种类和检测指标(介素类、因子类)及标本数量(48T/96T)通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起，现货产品一周内将检测报告交到客户手中！

 

◇      注意事项：

收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分**类标本需添加抑肽酶。

 

◇      液体类标本

标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。

 

◇      血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

 

◇      血浆：

应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10％(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

 

◇      尿液、胸腹水、脑脊液：

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

 

◇      细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

 

◇      组织标本：

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。