一,概述
黄曲霉**是一类**(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液,动物饲料等相关的产品中。其中黄曲霉**B1(AFB1)的毒性、致癌性、污染频率均居首位。薄层色谱一直都是检测黄曲霉**常用的方法,但是此方法制备样品及分析样品时费时又费力。而使用黄曲霉**B1 ELISA试剂盒则能够快速准确的分析样品中黄曲霉**B1的残留。
本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,操作时间仅需80分钟,试剂盒灵敏度为0.1ppb,线性范围为0.1ppb~8.1ppb。
一、原理
本试剂盒采用间接竞争法。酶标板上包被的抗原与加入的校准品(或样本)中的抗原竞争结合加入的抗体。洗去多余的抗体,加入酶标二抗与抗体结合,洗去多余酶标二抗,用TMB底物显色,样本吸光值与其残留物黄曲霉**B1负相关,与校准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中黄曲霉**B1的含量。
二、适用范围
可定性定量检测玉米、花生、谷物、饲料、食用油等样本中黄曲霉**B1的残留量。
三、试剂盒技术指标
试剂盒灵敏度:0.1ppb
检测线性区间:0.1ppb-8.1ppb
样本*低检测限:
花生、玉米、谷物……………………………2ppb
饲料…………………………………………1.25ppb
食用油…………………………………….……..1.5ppb
回收率:
花生、玉米、谷物 90±10%
饲料 85±10%
食用油 90±10%
四、试剂盒组成
1.酶标反应板:96孔微孔板(12条×8孔规格)
2.黄曲霉**B1校准品:1mL/瓶×6瓶 0ppb、1ppb、3ppb、9ppb、27ppb、81ppb
3.抗体工作液:7mL/瓶×1瓶………….蓝色盖
4.酶结合物:10mL/瓶×1瓶…………….红色盖
5.底物A液:7mL/瓶×1瓶…………….黄色盖
6.底物B液:7mL/瓶×1瓶………….…黑色盖
7.终止液: 7mL/瓶×1瓶…………….白色盖
8.浓缩洗液(×10):50mL/瓶×1瓶………透明盖
9.浓缩复溶液(×2):50mL/瓶×1瓶…….透明盖
10.其他:
说明书×1份;封板膜×2张;自封袋×2个
五、试剂盒组成
六、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器
1.仪器
微孔酶标仪、氮气吹干装置、打印机、均质器、振荡器、离心机、恒温箱、天平(感量0.01g)、
刻度移液管
2.微量移液器:单道20μL-200μL、100μL-1000μL、多道250μL
3.试剂:甲醇、正己烷、二氯甲烷
(四)样品的保存
1.未处理的样品室温干燥处保存。
1.处理好的样本在2~8℃稳定1周。
十一、储藏条件和保质期
储藏条件:试剂盒于2~8℃保存,不要冷冻。
保质期:该产品有效期为12个月,生产日期见包装盒