氯离子通道具有多种重要的生理和细胞功能，包括pH调节，体积稳态，有机溶质运输，细胞迁移，*******。选择正确的试剂检测，才能让实验事半功倍。百萤为您推荐AAT Bioquest研发的Screen Quest氯化物检测试剂盒。
许多慢性**状态如囊性纤维化和Bartter综合征是由于氯离子通道功能的缺陷。氯离子通道代表有价值的**靶标。然而，用于筛选氯离子通道调节剂的现有技术是吞吐量，灵敏度和生理相关性之间的折衷。我们开发了一种强大的比色氯化物通道测定法，为研究氯离子通道提供了一种灵敏而方便的方法。该测定基于新的生色碘化物指示剂Iodide Blue TM，用于测量碘化物浓度。通过该测定可以检测到低至30nM的碘化物。该测定比荧光氯指示剂（例如SPA，MQAE和光泽精等）更敏感，其仅能检测氯离子浓度。与膜电位测定相比，这种新的氯离子通道测定更具选择性。基于Iodide Blue的氯离子通道测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。
通过使用这种新方法可以测定WSS-1和CFPAC1细胞中的向内和向外电流活性。 非放射性，高灵敏度的特性使Screen Quest™比色氯化物测定成为HTS应用的可靠方法。
Screen Quest™比色氯化物通道检测试剂盒提供了一种筛选氯通道靶标的优化方法，具有以下优点和特点：
灵敏度高：可以检测到低至30 nM的碘化物。
毒性*小：试剂比经典的Sandell和Kolthoff方法更**。
方便：配方具有*小的手动操作时间。
Screen Quest™比色氯化物通道分析
碘化物浓度的增加与308,405或630nm处的吸光度成比例
数据分析
图1.使用Screen Quest™比色氯化物通道测定试剂盒测量96孔黑色板上的碘化物剂量响应。 低至30 nM（10 pmol /孔）的碘化物可以在10分钟的孵育时间内检测到（n = 3）
图2.CFPAC-1细胞中的毛喉素剂量响应以诱导CFTR氯离子通道内向电流活性。 将CFPAC-1细胞在96孔黑壁/透明底板中的生长培养基中以每100μl/孔40,000个细胞接种过夜。 将细胞用碘化物负载缓冲液中的毛喉素在37℃，5％CO 2培养箱中处理5分钟以达到*终指定的浓度。 用Screen QuestTM比色氯化物通道测定试剂盒测量细胞碘化物浓度。
图3. WSS-1细胞中的GABADose响应诱导GABAA通道内向电流活动。 将WSS-1细胞在96孔黑壁/透明底板中的生长培养基中以每100μl/孔40,000个细胞接种过夜。 将细胞用GABAA在碘化物上样缓冲液中在37℃，5％CO 2培养箱中处理5分钟以达到*终指定的浓度。 用Screen QuestTM比色氯化物通道测定法测量细胞碘化物浓度。
图4. WSS-1细胞中的GABADose响应诱导GABAA通道向外流动活动。 将WSS-1细胞在96孔黑壁/透明底板中的生长培养基中以每100μl/孔40,000个细胞接种过夜。 将细胞在碘化物上样缓冲液中温育4小时，然后在37℃，5％CO 2培养箱中用GBSA在DPBS中处理5分钟以达到*终指定的浓度。 用Screen QuestTM比色氯化物通道测定试剂盒测量细胞碘化物浓度。
图5.GABAA通道抑制剂印防己**和荷包牡丹碱在GABA诱导的WSS-1细胞中对GABAA通道外向电流活性的影响。 将WSS-1细胞在96孔黑壁/透明底板中的生长培养基中以每100μl/孔40,000个细胞接种过夜。将细胞在碘化物上样缓冲液中孵育4小时，在*后30分钟碘化物加载缓冲液孵育时间加入不同浓度的印防己**或荷包牡丹碱，通过在37℃下在DPBS中加入100μMGABA5分钟激活GABAA通道，5％ CO2培养箱。 用Screen QuestTM比色氯化物通道测定试剂盒测量细胞碘化物浓度。
Screen Quest™比色氯化物通道分析试剂盒提供非放射性和优化的稳健方法，用于功能表征氯离子通道。 该测定可以检测低至30nM的碘化物浓度，其比原子吸收光谱仪和荧光氯化物指示剂的灵敏度高> 100倍。 用这种新方法成功地测定了CFTR和GABAA氯离子通道的向内和向外电流活性。
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