基因组DNA提取服务|实验技术服务

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基因组DNA提取服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
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测序实验流程：
DNA提取试剂盒是根据氯化芐法构建的，能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。氯化苄具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化，从而破坏细胞壁的特性。本制品利用了氯化苄的这一特性，将植物样品冻结融解后，再使用Pipet Tip的**将植物样品在Microtube壁上数次按压即可破坏细胞壁。
保存方式
室温。低温保存可能会有沉淀析出。如果发生析出现象，请于50℃溶解后，再于室温保存。
操作方法
全套操作约需1小时，分匀浆、细胞裂解、除蛋白、DNA纯化等步骤，详细说明如下。
一. 匀浆和细胞裂解。
使用不同的实验材料需采用不同的匀浆步骤，具体说明如下：
【从动物组织中提取基因组DNA】
使用研钵进行匀浆时：
① 取1～100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的研钵中，快速用力展研成匀浆。
注）下列组织请加液氮研磨至粉末状。
A．富含DNA酶的胰脏、脾脏、胸腺、淋巴等组织。
B．富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等组织。
C．富含角质蛋白的组织或坚硬的组织（如骨骼）等。
② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1，温和研磨30秒钟。
注）使用上述①-注）的实验材料时，请在加入Solution A及RNase A1后，将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。
③ 收集650 μl研磨好的组织匀浆液移至Collection Tube中。如果匀浆体积不足650 μl，请补充Solution A至650 μl，65℃保温5分钟。
二.使用研磨棒进行匀浆时：
① 取1～100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的Collection Tube 中，用研磨棒快速研磨成糊状。
② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成匀浆。
③ 加入350 μl的Solution A将研磨棒上的匀浆冲入Collection Tube中，充分振荡混合后，65℃保温5分钟。
三.使用悬浮培养的动物细胞时：
① 使用Collection Tube收集1×105～1.5×107的细胞悬浮液，5,000 rpm离心5分钟，弃上清（细胞培养液）。
② 加入150 μl的灭菌蒸馏水或PBS悬浮细胞。
③ 加入500 μl的Solution A和0.8 μl的RNase A1，激烈振荡15秒钟，然后室温静置1分钟。