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细胞毒实验(MTT法)服务|实验技术服务

日期:2024-12-25 00:50
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关键词:细胞毒实验(MTT法)服务|实验技术服务
简介:世界****细胞毒实验(MTT法)服务|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。
细胞毒实验(MTT法)服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌:细胞毒实验(MTT法)服务|实验技术服务   http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
测序实验流程:
(Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit) 以MTT为指示剂,在经典操作方法的基础上,采用了独特的甲簪溶解液,可以直接溶解甲簪,而无需离心去除原有的培养液,故可避免因甲簪部分被吸除而引起的操作误差,具有本底低,灵敏度高,线性范围宽,操作简便等特点。  
保存条件 
    MTT溶液-20℃保存,一年有效;Formazan溶解液室温或-20℃保存。 
使用说明 
    1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
    2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
    3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞药物; 
    4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
    5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
    6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
步骤
1、接种细胞 :用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200ul。
2、培养细胞 :同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。
3、呈色 :培养3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS 配)20ul.继续孵育4小时,终止培养,小心吸弃孔内培养上清液,对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO,振荡10分钟,使结晶物充分融解。
4、比色 :选择490nm波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录结果,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。