方法一：称取试样10克(±0.01g)于容量瓶中,加流动相溶液100ml溶解,超声提取30min静置,取上层，8000转高速离心，取上层过0.45滤膜备用。方法二：称取试样10克(±0.01g)于容量瓶中,加50%乙腈—水溶液100ml溶解，超声提取30min静置,取上层，5000转高速离心，取上层过0.45滤膜备用。方法三：称取试样5克((±0.01g)，加15ml1%三***，超声提取30min，8000转高速离心，上层用滤纸滤过，将样品上活化的MCX柱(OasisMCX3cc/60mg，PN：186000254)，用3ml水，3ml甲醇，抽干，5%氨水甲醇溶液3ml洗脱，蒸干，用2：8甲醇—水定容，过0.45um滤膜，备用。方法四：标样：取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50ml得到1000ppm的标准溶液，使用时，以提取液(0.1%三***)稀释到所要的浓度.提取:称取样品5g,加入50ml0.1%三***提取液,充分混匀,加入2ml2%乙酸铅溶液,超声20min.然后取部分溶液转移至10ml离心管

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1前言依据GB/T22388&mdash;2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法，本文提供了LC98-II型高效液相色谱仪(HPLC)对原料乳及乳制品中三聚氰胺的高效液相色谱(HPLC)检测方法。2范围GB/T22388&mdash;2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中，提出高效液相色谱法的定量限为2mg/kg，液相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.01mg/kg。而本文所提供的LC98-II型高效液相色谱仪(HPLC)对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。3高效液相色谱法3.1原理试样用三***溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，外标法定量。3.2试剂与材料均按GB/T22388&mdash;2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法的3.2操作。3.3仪器和设备3.3.1LC98-II型高效液相色谱仪(北京温分分析仪器技术开发有限公司)：配有P98-II型高压输液泵及UV98-II型紫外检测器。3.3.2分析天平：感量为0.0001g和0.01g。3.3.3离心机：转速不低于4000r/min。3.3.4超声波水浴。3.3.

三聚氰胺简称三胺、氰脲酰胺，是一种用途广泛的具有氮杂环结构的有机化工原料，因其结构中还有多个氨基氮，而目前对蛋白的定量主要依靠凯式定氮，因而三聚氰胺被一些不法商贩添加到蛋白中以提高蛋白检测中氮的含量。2007年3月美国发生的猫狗宠物非正常死亡事件以及*近国内的奶粉事件都是由此造成的。目前，检测三聚氰胺的主要方法是HPLC、LC-MS、GC-MS，但对仪器及实验室要求较高，样品处理和操作也相对要求较高。相对而言，检测试剂盒操作方便，且不需要大笔的仪器投入，同时也具有很好的灵敏度。这类试剂盒多采用直接竞争性酶联**检测(ELISA)，对UD和60%甲醇两种方法处理样品所获得的三聚氰胺萃取液进行**测定可以获得相同的结果，可用来定量检测被污染样品中的三聚氰胺。检测原理：三聚氰胺检测试剂盒是竞争性酶联**反应。三聚氰胺从样品中萃取出来。三聚氰胺-HRP，样品萃取液和标准品一起加入包备有三聚氰胺抗体的微孔中发生反应，经过30分钟的培养，样品中的三聚氰胺和三聚氰胺-HRP与三聚氰胺抗体竞争性结合，任何没有结合的三聚氰胺和三聚氰胺-HRP将被冲洗掉，显色酶底物加入微孔中，任何结合的三聚氰胺-HRP都

三聚氰胺是一种化工原料，在奶粉、蛋白粉等食品或饲料中添加三聚氰胺可以造成蛋白质含量达标的假象。因此，三聚氰胺也被称为&ldquo;蛋白精&rdquo;，大量摄入会损害人体健康。2008年10月7日，国家质量监督检验检疫总局与标准化管理委员会联合发布了《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》，即国标GB/T22388-2008。这一新标准制定了高效液相色谱法、液相色谱-质谱/质谱法及气相色谱-质谱联用法三种检测方法与标准，同时明确检测对象及其限量。三聚氰胺标准品色谱图GB/T22388&mdash;2008检测方法专用标样及配套产品产品编号产品名称规格价格CAS138574Melamine,99%;三聚氰胺1g￥100108-78-15g￥120FDA-PROP-001-SETFDA-GC-MS-ScreenforMelamine,Ammeline,AmmelideandCyanuricAcid&diams;Melamine,1000&micro;g/mLinDiethylamine/Water（1mL）&diams;Ammeline,1000&micro;g/mLinDiethylamin

检测方法利用酶联**吸附测定法用食品及饲料中三聚氰胺的定量测定。检测原理酶联**吸附测定法定量测定三聚氰胺残留。利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行**测定。先将三聚氰胺酶标记物，样品萃取物及标准加入到已经包被有三聚氰胺抗体的微孔中开始反应。在30分钟的孵育过程中，样品萃取物中的三聚氰胺与三聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的三聚氰胺抗体，孵育30分钟后洗掉小孔中所有没有结合的三聚氰胺及三聚氰胺酶标记物。在用去离子水清洗结束后，每孔中加入清澈的底物溶液，结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。孵育30分钟后停止此反应，根据各孔颜色深浅进行数据读取。依据标准的颜色得出样品中三聚氰胺的的浓度值。实验所需设备及材料三聚氰胺检测试剂盒(目前常用进口试剂有美国Abraxis公司和美国Beacon公司的)酶标仪一台(配有450nm滤光片)1-5ml可调移液器100-1000ul可调移液器.20-200ul可调移液器.蒸馏水或去离子水..可吸取50ul的移液器及吸头.可吸取50ul和100ul的八道移液器及吸头.吸水纸或相当的吸水材料.450nm的酶标仪.计时器.洗瓶混旋器.20mM

1.概述此试剂盒的原理是酶联**测定法，这个试剂盒可用于一切样品中三聚氰胺的定性或定量检测。如果需要进一步测定可以利用HPLC,GC/MS技术。2.**指导试剂盒标准中含有少量的三聚氰胺，另外，底物溶液中含有四甲基联苯胺，终止液里含有稀释的盐酸。尽量避免不要和这些试剂接触，如果这些试剂接触到皮肤请马上用水冲洗。3.存储和稳定性试剂盒应在4&ndash;8℃保存，在使用前试剂盒内的所有试剂都要回温到室温(20-25℃)在有效期内试剂可以一直使用4.原理酶联**吸附测定法定量测定三聚氰胺残留。将标准、样品提取物和三聚氰胺酶标记物加入到已经包被有三聚氰胺抗体的微孔中开始反应。在30分钟的孵育过程中，样品萃取物中的三聚氰胺与三聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的三聚氰胺抗体，孵育30分钟后洗掉微孔中所有没有结合的三聚氰胺及三聚氰胺酶标记物。在用稀释的洗液清洗结束后，每孔中加入清澈的底物溶液，结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。孵育20分钟后停止此反应，根据各孔颜色深浅进行数据读取。依据标准的颜色得出样品中三聚氰胺的的浓度值。5.局限性我们已经对可能出现在检测样品中的很多有机和无机物做了检测，

目标通过简便快捷的技术，使用*少的样品，在不使用色谱分离的条件下有效检测各类乳制品中潜在的三聚氰胺。背景三聚氰胺的商业用途包括白木板、地板砖、厨具、防火纤维以及滤器。2007年3月，在用于制造宠物食品的麦芽糖浆和大米蛋白精中发现了三聚氰胺，导致了大批宠物猫狗因肾衰死亡。08年9月发生了牛奶、婴儿奶粉、奶制品掺杂三聚氰胺的全球恐慌，中国报告了约300000例患者，6例婴儿死于肾结石和其他肾损伤。为什么会发生这些问题?向动物饲料中添加三聚氰胺是已被接受的长期做法，三聚氰胺可通过常规蛋白质测试，不被检出，且可提高凯氏定氮法检测食品蛋白质含量的结果。而这*后可提高利润，而大宗奶制品行业的边际利润是很小的，这种手段简便低廉，且法规对其限制很松。每个样品耗时小于2.5分钟，ASAP与ACQUITYTQD共同使用可快速筛查各类样品中法规规定的三聚氰胺水平。全球反响对于**水平和须测试的产品类别，各地的反应快速但有所不同。■美国食品药品监督管理局和欧洲食品**'>食品**局准许的每日摄入分别为0.63以及0.5mg/kg体重。■国际上该限值具有不同的水平■香港：食品中=2.5mg/kg，婴儿奶粉中=1

检测方法GC-MS法测定动物食品中的三聚氰胺Spectra-Quad实现三聚氰胺含量在线检测超高效液相色谱_电喷雾串联质谱法测定饲料中残留的三聚氰胺反相高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺的含量高效液相色谱-二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺高效液相色谱法(HPLC)测定饲料中三聚氰胺的含量高效液相色谱-四极杆质谱联用测定饲料中三聚氰胺含量固相萃取与高效液相色谱联用测定宠物食品中三聚氰胺液相色谱串联质谱法(LC-MSMS)分析宠物食品中三聚氰胺液相色谱-串联质谱法测定饲料中三聚氰胺残留GC-MS法测定动物食品中的三聚氰胺附：三聚氰胺检测方法示例仪器与条件高效液相色谱仪;二极管阵列检测器(DAD)，检测波长240nm，柱温：40℃。(1)AgelaVenusilTMASBC18(4.6&times;250mm);缓冲液：10mM柠檬酸,10mM庚烷磺酸钠;流动相：缓冲溶液:乙腈=85:15;流速：1.0mL/min。(2)AgelaVenusilTMASBC8(4.6&times;250mm);流动相：缓冲液：乙腈=85：15;缓冲液：10mM柠檬酸，10mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0;

食品中三聚氰胺的污染事件是近来社会关注的热点。从去年出口美国的宠物饲料中被检测出三聚氰胺到现在发现我国几十种品牌的奶制品均受三聚氰胺的污染。无不引起人们对食品**的担扰，也引发了一股开发研究三聚氰胺检测方法的热潮。三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料，水溶液显弱碱性，能溶于甲醇、乙酸等，微溶于水和乙醇，不溶于乙醚、苯等，而且在传统C&shy;18柱上保留很差。利用此特性，人们普遍采用离子对试剂液相色谱法和液质联用方法进行检测。但由于食品基质复杂，使得样品的前处理甚为关键。我们采用三***提取，MCX固相萃取小柱净化，辅以J2加压固相萃取仪操作，建立一套快速、准确、重现性良好的样品外理方法。1.材料与方法1.1主要仪器与试剂：AgilentHP1100高效液相色谱仪、配四元梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、J2SCIENTIFIC(绿绵巨贸)公司加压固相萃取仪、超声波清洗器、离心机、固相萃取小柱：OASISMCX，6mL，500mg。三聚氰胺标准品，纯度99%。1.2样品处理1.2.1提取准确称取经粉碎混匀后样品5.0g，加入50mL1%三***溶液及2mL

4月1日，美国研究人员报告说，他们开发出一种简单、方便的新方法，可在短时间内检测出牛奶中是否含有三聚氰胺。美国迈阿密大学、西北大学和加州大学洛杉矶分校等机构的研究人员月报告说，他们先将盐酸注入牛奶中，沉淀出酪蛋白，以防止其干扰对三聚氰胺的检测。然后在牛奶溶液中加入金纳米粒子，这种粒子在溶液中彼此距离较远时，溶液呈红色；距离变近时，溶液呈蓝色。研究人员指出，三聚氰胺可以改变金纳米粒子的排列距离，从而导致溶液颜色发生变化。因此，如果加入金纳米粒子后溶液颜色改变，就说明其中可能含有三聚氰胺。为保证准确性，研究人员随后往溶液里加入氰尿酸，后者与三聚氰胺发生反应后会形成肉眼可见的沉淀物。研究人员介绍说，利用这种新方法，可在不超过15分钟时间内检测出牛奶中所含三聚氰胺。相关研究成果已发表在美国《应用物理通讯》杂志上。三聚氰胺是一种低毒化工原料，过量摄入会对泌尿系统产生危害。世界卫生组织2008年将这一化学物质每日可容忍摄入量设定为每公斤体重0．2毫克。您可能会对本公司的以下产品感兴趣：定氮仪∣全自动凯氏定氮仪∣索氏抽提器∣索氏抽提仪∣蛋白质测定仪∣马弗炉∣可见分光光度计∣紫外可见分光光度计∣火焰分

美国研究人员4月1日报告说，他们开发出一种简单、方便的新方法，可在短时间内检测出牛奶中是否含有三聚氰胺。美国迈阿密大学、西北大学和加州大学洛杉矶分校等机构的研究人员报告说，他们先将盐酸注入牛奶中，沉淀出酪蛋白，以防止其干扰对三聚氰胺的检测。然后在牛奶溶液中加入金纳米粒子，这种粒子在溶液中彼此距离较远时，溶液呈红色;距离变近时，溶液呈蓝色。研究人员指出，三聚氰胺可以改变金纳米粒子的排列距离，从而导致溶液颜色发生变化。因此，如果加入金纳米粒子后溶液颜色改变，就说明其中可能含有三聚氰胺。为保证准确性，研究人员随后往溶液里加入氰尿酸，后者与三聚氰胺发生反应后会形成肉眼可见的沉淀物。研究人员介绍说，利用这种新方法，可在不超过15分钟时间内检测出牛奶中所含三聚氰胺。相关研究成果已发表在美国《应用物理通讯》杂志上。三聚氰胺是一种低毒化工原料，过量摄入会对泌尿系统产生危害。世界卫生组织2008年将这一化学物质每日可容忍摄入量设定为每公斤体重0.2毫克。

记者22日从黑龙江省卫生厅获悉，由黑龙江省**控制中心专家新近完成的一项科研课题，在国内外**系统地揭示了三聚氰胺引发动物肾损伤的发病机理、病变特点、肾脏结晶体形成的条件。研究结果为相关部门对三聚氰胺风险评估、制定食品和饲料中三聚氰胺的**管理限量值提供了重要科学依据。该成果近日获得2009年度黑龙江省医药卫生科技进步一等奖。因三聚氰胺并非食品添加剂，国内外对三聚氰胺毒性研究资料掌握甚少，对三聚氰胺所造成肾损伤的量效关系、结晶体与肾脏病理损伤的关键环节等问题也缺乏深入探讨。据此，黑龙江省**控制中心毒理所主任医师王玉燕等**成功建立三聚氰胺在肾脏形成结晶的大鼠动物模型，重现了这一**的病变过程。该模型方法科学先进，有可重复性。研究结果揭示肾脏为三聚氰胺的毒作用靶器官。其发生机理是三聚氰胺在胃内由胃酸催化水解生成三聚氰酸，两者在肾脏再结合形成三聚氰胺&mdash;三聚氰酸结合晶体，晶体充满肾小管，使肾脏体积增大、重量增加，因管壁的挤压作用而使肾组织严重缺血，导致肾脏呈现出特征性土黄色沙石样的外观。观察结果还表明，三聚氰胺结晶体还可导致肾脏炎症反应和纤维组织增生等病理改变，进一步引发肾脏代

用安捷伦液相色谱仪Agilent1200分析三聚氰胺三鹿事件&rdquo;再次敲响了食品**的警钟，也引起全社会广泛关注。安捷伦仪器有限公司结合多年液相色谱仪和色谱柱研制、开发及应用的经验，利用*新研制的1200液相色谱仪和全新开发的Elite-MSP专用分析柱，不仅对三聚氰胺有很好的保留，获得**的峰形，而且能有效分离样品中可能存在的干扰物质。该方法准确性好、灵敏度高、线性范围宽、性能稳定、易于推广，投资省。配套采用安捷伦分析仪器有限公司的P系列等度紫外检测系统，并辅助DAD光谱定性功能，能用*低的投入准确完成三聚氰胺样品的定性及定量分析。色谱条件（农业部标准）色谱柱：EliteMSP5&micro;m,ID4.6mm&times;250mm流动相：乙腈/缓冲液，10/90(缓冲液中含10mM柠檬酸，10mM庚烷磺酸钠)流量：1.0mL/min检测波长：UV240nm进样量：10&micro;L柱温：40℃注：奶粉样品及标准品均取自大连市产品质量监督检验所。液相色谱仪仪器配置项目仪器名称数量11200四元高压恒流泵1台2紫外可见波长检测器1台3高压进样阀1只4色谱数据处理工作站1套5