一、操作步骤：1)首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止)。4)一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，*重要的是仪器基线走后，方可进样测试。5)同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。6)样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。7)关机时，先关计算机，再关液相色谱。8)填写登记本，由负责人签字。二、注意事项：1)流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2)柱子是非常脆弱的，**次做的方法，先不要让液体过柱子。3)所有过柱子的液体均需严格的过滤。4)压力不能太大，*好不要超过150kgf/cm2.5)

潮湿环境中如何维护液相色谱仪操作人员*关心的是分析结果，而检测器是HPLC的眼睛。由于很多时候天气潮湿，很容易使检测器精密的光学部件性能受到影响，导致灵敏度下降或波长检验通不过，更严重者：灯电路板、预放大板及CPU板同时被短路击坏。而这类情况在干燥的北方地区则比较少。由此可见，潮湿气候对仪器损害之大。在多雨季节到来之前，勿请用户将仪器调整放置在通风条件好，湿度低(<70%)的实验室内。同时，给实验室配备去湿机、空调及通风装置。表面上看，虽然增加了支出，但您的实际回报将大大超出您的支出。

多环芳烃(polycyclicaromatichydrocarbon)是分子中含有两个以上苯环的碳氢化合物，包括萘、蒽、菲、芘等150余种化合物。是一类化学致癌物质，对人体健康有潜在的危害，目前世界各国都非常重视环境中多环芳烃的检测。SUPELCOSILLC-PAH柱是按照美国EPA方法610标准设计的用于检测多环芳烃的专用柱。SUPELCOSIL™LC-PAH液相色谱柱，可提供3µm和5µm两种颗粒可供选择。3μm色谱柱在保持多孔硅胶的耐用性的同时，能提供极其快速和高效的分析。2.1mm和3.0mm色谱柱可节约溶剂和提高灵敏度，特别是样品量有限时尤为重要。孔径：120Å固定相：C18颗粒：球形硅胶应用举例一5µm颗粒SUPELCOSIL™LC-PAH柱分析多环芳烃色谱柱：SUPELCOSILLC-PAH，25cm×4.6mmI.D.，5µm(货号58229)移动相：A=water;B=CH3CN流速：1.5mL/min检测器：V，254nm进样：3μLLC-PAH混标(货号48

分析仪器液相色谱仪常见故障处理1、柱压高原因(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;(2)样品污染沉积。处理对于**种情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于**种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,*后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。2、气泡溢出流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法**不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如

五味子为木兰科植物五味子的干燥成熟果实，是临床常用中药。五味子含量测定方法包括：二阶导数紫外分光光度法、薄层色谱-比色法、薄层色谱-紫外分光光度法、薄层色谱、光密度法、高效液相色谱法等。下面我们介绍的是由LC-10ATVP高效液相色谱仪测定五味子含量的方法：1）色谱条件色谱柱为DiamonsilC18柱(4.6mm×200mm，5μm)；流动相为甲醇-水(13∶7)；流速1.0ml/min；柱温30℃；检测波长250nm。在此色谱条件下，五味子醇甲与其他杂质峰完全达到分离(R﹥1.5)，理论板数按五味子醇甲峰计在2000以上。2）对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品15mg，精密称定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升含五味子醇甲0.3mg)。3）供试品溶液的制备取本品粉末(过3号筛)约0.25g，精密称定，置20ml量瓶中，加甲醇约18ml超声处理20min，取出，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。4）检测分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，在250nm处检测。

1、柱压高原因(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;(2)样品污染沉积。处理对于**种情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于**种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,*后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。2、气泡溢出流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法**不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续

分析仪器高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。分析仪器高效液相色谱分离是利用试样中各组分在色谱柱中的淋洗液和固定相间的分配系数不同，当试样随着流动相进入色谱柱中后，组分就在其中的两相间进行反复多次（103-106）的分配（吸附－脱附－放出）由于固定相对各种组分的吸附能力不同（即保存作用不同），因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，顺序离开色谱柱进入检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录器上描绘出各组分的色谱峰。在同一色谱条件下，样品中K值大的组分在固定相中滞留时间长，后流出色谱柱；K值小的组分则滞留时间短，先流出色谱柱。混合物中各组分的分配系数相差越大，越容易分离，因此混合物中各

液相色谱仪操作规程一、打开电脑二、打开主机、预热三、进入仪器工作站，联机并设定仪器使用方法及仪器参数四、启动泵的动力系统预处理（排气等）五、检查是否漏夜、柱压是否正常六、设置仪器方法，包括仪器的使用条件等七、激活操作方法，等待仪器平衡、基线平直八、仪器出现“Ready”后可进行样品分析九、操作测试结束后，清理所有实验材料，做好清洁卫生十、记录仪器使用日志，并与管理员办理交接手续液相色谱仪操作注意事项一、高效液相色谱的流动相应采用色谱纯溶剂，以满足仪器要求、避免损坏色谱柱；二、严禁使用有污染的水等冲洗色谱柱，避免将互不相溶的溶剂一同进入泵内；三、流动相需经过滤、除气后方可使用；四、待分析的样品必须彻底溶解澄清、过滤，以避免堵塞、损坏色谱柱；五、分析完成后，须注意及时清洗色谱柱和检测器的比色池

高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。1．进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。2．输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X107Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。3.分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"**不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）．固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有

高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。1．进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。2．输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X107Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。3.分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"**不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）．固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有

高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。按照客户要求搭配和组合。所以价格有相应的变动，且变化范围空间很大。所以在选购时要慎重考虑。1．进样系统：进样器或高压进样间2．输液系统：高压泵、流动相贮存器和梯度仪3.分离系统：色谱柱、连接管和恒温器4．检测系统：紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。5.数据处理系统：采集、贮存、显示、打印和处理很明显，紫外检测器是重点。它本身就有很大的伸缩空间，是选择进口还是国产，选择什么参数范围的检测仪都影响价格。其他相关产品也是一样。所以，在购买前，要先弄清自己的用途是什么，被测物品是什么。再根据现有市场价格变动灵活变动，不要认定一种自己已知型号胡乱配套。即先要说明是测什么样品，再锁定市场小到主要配件的型号，之后其他产品再流水式配套，配套好之后，再看有没有可替代同类产品，以缩小价格。这样，才能买到您心仪的产品。上海金鹏分析仪器有限公司www.jp1718.com电话：021-361623666095997161425398手机：137643569381891819971013585698333QQ:842727501

高效液相色谱仪采购要求一、配置要求：1、四元泵(含脱气机)；2、柱温箱；3、自动进样器；4、紫外检测器；5、工作站软件；6、必备附件、零配件；7、国内外知名品牌计算机和激光打印机：CPU：Intel(Core2Duo2.0G以上)；主板：**P965；DVD光驱；独立显卡(主流256MB或以上，支持DX10)；内存2GB(DDR2)；硬盘(SATA250GB或以上)；液晶显示器(19寸宽屏)一台；激光打印机一台(黑白打印机，国际知名品牌)；8、每台机器除保修一年外，另加一年的维修合同。二、技术要求：1、四元泵：通过**高速比例阀控制形成低压四元梯度混合，标准配置在线真空脱气机。*流速范围：0.001~10mL/min,0.001mL/min步进；*流速精密度：《0.07%RSD或≤0.02minSD；*流速准确度：±1%或10uL/min；*压力脉动：《1%；*梯度组成精度：《0.20%SD（0.2及1mL/min）；*梯度组成比例范围：0~95%或5~100%；*梯度延迟体积：800~1100uL（与反压相关）；2、在线真空脱气机：四通路在线真空膜过滤技术，内置真

液相色谱仪常见问题分析及处理1、流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法**不断产生的气泡。原因剖析：过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。故障处理：过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0～3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。2、柱压高原因剖析：(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;(2)样品污染沉积。故障处理：对于**种情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高

高效液相色谱仪的几个使用问题1.色谱柱中的流动相会排干吗？不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。相比之下，另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干涸的情况不太容易发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。2.使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接头需要注意什

液相色谱仪色谱柱维护每天用足够的时间来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得*大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长！------一定得做！新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。平衡色谱柱反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10－20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡如何平衡色谱柱？平衡过程中，将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低，则需要较长的时间来平衡)色谱柱的再生进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议*好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。表1建议用来冲洗的