液相色谱仪在使用中整个液路系统有两个地方易产生气泡!1、泵头吸液白管。2、检测口流通池。气泡产生的原因：温度上升，压力下降!温度上升或柱温上升，当接近试剂沸点时，试剂汽化产生气泡，试剂中已含微小气泡，因加热变大而产生气泡。压力下降产生气泡，流动相中一直包含微小气泡，无论超声过滤，均不能池底去掉它，那么当压力下降时，微小气泡将长大，且多个小气泡易聚集成大气泡，而影响正常实验。下面分部位说明气泡产生原因及解决办法:一、泵头及吸液白管。1、泵头：泵头是压力变化*剧烈的地方，也是*易产生气泡的地方，泵头靠负压而吸液，而负压必然使流动相中的小气泡长大，当泵腔变正压时，已长大的气泡未必能全部变小流入后续液路，则泵腔内将积存气泡，从而影响吸液精度，鉴于此，泵头上专门设计了排气阀，便于泵头排气，观察柱压稳定了说明泵头排气成功。2、吸液白管长气泡。a、吸液白管接触空气部位漏气，产生可见气泡，吸液白管是常压和负压交臂变化部位，其漏表现为大气进入白管内，而不易见到管内液体漏出。处理方法：更换白管。b、滤头堵：滤头堵使得液体流入滤头的速度下降，泵强制吸液而产生真空气泡。判断：拔掉滤头不再长气泡则是滤头堵。处理

制备泵P230P型恒流泵流量范围：0.10-40.00mL/min*高工作压力：30MPaP270型恒流泵流量范围：1.0-50.5mL/min*高工作压力：20MPaP280型恒流泵流量范围：3-300mL/min*高工作压力：20MPa检测器UV230+型紫外可见检测器波长范围：190-720nm可配不同体积的检测池，供制备用。UV200Ⅱ型紫外可见可变波长检测器波长范围：190-600nm可配不同体积的检测池，供制备用。色谱柱提供Hypersil、Spherisorb、SinoChrom等品牌填料装填的半制备和制备色谱柱，规格齐全。进样阀推荐Rheodyne3725i-038不锈钢材质，不断流设计(MBB)，带自动触发开关，手动进样阀。本公司另备有其他型号的制备用进样阀，请查询。定量管美国Rheodyne公司原装制备用定量管，定量体积2-20mL，材质有不锈钢和PEEK。推荐Rheodyne3065-023定量体积10mL(内径2.0mm)。馏份收集、切换阀多种馏份收集、切换阀供选择，包括三路、六路切换阀，原装部件，性能可靠。推荐流路切换选Rheodyne5032三路Teflon

工作原理该仪器是由AKTA公司生产的高效液相色谱仪，其原理是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论，并且对相体进行了改革，配用高压输液泵，采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。2、技术参数泵的流速:0?100ml/min*大耐压:600psi(40bar)紫外检测范围:0.01-5AU波长选择:254、280、313、365、405、436、546、214nm温度范围:4-60℃电导率范围:1us/cm?999.9ms/cm3、系统组成本系统由泵Pump-920、检测仪MonitorUPC-900、混合仪MixerM-925、进样阀ValveINV-907、部分收集器Frac-900、收集采集系统、打印机等部件组成。4、系统特点①高压供液压力和进样压力都很高,一般可达0-5Mpa②高速载液在色谱柱内的流速比经典液相色谱高很多,可达0-100ml/min③高效由于采用了新型的固定相,提高了分辨率④高灵敏度采用了基于光学原理具有高灵敏度的检测器,之外吸收检测灵敏度可达到10-9g/ml数量级⑤梯度洗脱洗脱液的组成可以是连续变化的,增加了洗脱强度,缩短了分析

随着*近几年我国以及世界各国对食品**等方面要求越来越严格，越来越多的用户选择液相色谱仪作为常规的检测仪器。但是，液相色谱仪属于技术含量比较高的产品，用户很难对目前市场上所有产品都有较为深入的了解。在选购仪器时，往往不能客观的判断这些产品到底孰优孰劣，大都凭着感觉，或是听信销售商的推荐。因此购买的仪器往往达不到用户的要求，在使用过程中还会出现各种各样的问题。就上述情况，我们谈一谈选择一台品质优良的液相色谱系统应该注意哪些方面。一、仪器各器件加工精度液相色谱仪是精密的分析仪器，所以要求工艺精湛、制作精良，才能保证其性能。一台好的仪器，从外形到内部的各个细节，都应该做工精良，控制面板字符清晰;功能键动作正确;旋钮转动顺滑;管接头螺纹加工精良，稍加力拧紧就密封良好;不锈钢材料与高性能树脂材料一定要能经受液相色谱常用液体的腐蚀。有些挑剔的用户会提出打开仪器的机箱盖来看看，这是一个很好的主意。好的仪器不仅外观好，更能做到里外如一，内部机械零件与线路板的加工也非常精良。打开机箱盖，可以看到仪器各部件安排合理、井井有条，调试与维修调换都非常方便。劣质的仪器各部件安排混乱，走线像乱头发一把。检查仪器内

本品为豆科植物大豆Glycinemax(L.)Merr.的成熟种子发芽干燥而得。大豆用水浸泡至膨胀，将水放出，用湿布覆盖，每日用清水冲洗一次或喷淋二次，待芽长至0.5cm～1cm时，取出，干燥。【性状】本品略呈肾形，长约8mm，宽约6mm。表面黄色或黄棕色，微皱缩，一侧有明显的脐点，一端有1弯曲胚根。外皮质脆，多破裂或脱落。子叶2片，黄色。气微，味淡，嚼之有豆腥味。以粒大、饱满者为佳。【鉴别】(1)取本品粉末1g，加稀乙醇30ml，超声处理30分钟，离心(3000转/分钟)10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加稀乙醇1ml使溶解，取上清液，作为供试品溶液。另取亮氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(19：5：5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)取本品粉末2g，加80%乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加80%乙醇1ml使溶解，取

高效液相色谱仪测定茶叶中黄曲霉**B11.适用范围本方法适用于出口茶叶中黄曲霉**B1含量的检验。2.原理概要样品用三氯甲烷提取，提取液经硅胶柱净化，净化后的提取液用三氟乙酸衍生，用配有荧光检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂三氯甲烷;正己烷;苯;甲醇：紫外光谱级;乙腈：紫外光谱级;三氟乙酸;乙腈-水溶液(1+1);三氯甲烷-甲醇溶液(95+5);苯-乙腈溶液(98+2);黄曲霉**B1标准品：纯度≥99%;黄曲霉**B1标准溶液：准确称取适量的黄曲霉**B1标准品，以苯-乙腈溶液于棕色容量瓶中，配成浓度为10μg/mL标准贮备液。根据需要，再配成适当浓度的标准工作溶液。3.2.仪器高效液相色谱仪，配有荧光检测器;天津恒奥硅胶小柱;天津恒奥振荡器：HMS系列;天津恒奥超声波：HU、HS系列;天津恒奥氮吹仪;天津恒奥滤膜：有机系用，0.45μm;天津恒奥微孔滤膜过滤器旋转蒸发器;微量注射器;离心管：5mL具塞磨口;粉碎机。4.试样的抽取与制备4.1.抽样方法从整批产品堆垛的上下不同部位随机抽取2.2规定的件数，逐件开启。分别倒出全部

HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。*早的液相色谱仪由粗糙的高压泵、低效的柱、固定波长的检测器、绘图仪，绘出的峰是通过手工测量计算峰面积。后来的高压泵精度很高并可编程进行梯度洗脱，柱填料从单一品种发展至几百种类型，检测器从单波长至可变波长检测器、可得三维色谱图的二极管阵列检测器、可确证物质结构的质谱检测器。数据处理不再用绘图仪，逐渐取而代之的是*简单的积分仪、计算机、工作站及网络处理系统。目前常见的HPLC仪生产厂家国外有Waters公司、Agilent公司(原HP公司)、岛津公司等，国内有大连依利特公司、上海分析仪器厂、北京分析仪器厂等。**步：输掖泵的选择输液泵是HPLC系统中*重要的部件之一。泵的性能好坏直接影响到整个系统的质量和分析结果的可*性。输液泵应具备如下性能：①流量稳定，其RSD应<0.5%，这对定性定量的准确

高效液相色谱仪'>液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。1.进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。2.输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47��4.4X107Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质(即使仅有一个基团的差别或是同分异构体)都能获得有效分离。3.分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm(需要两根连用时，可在二者之间加一连接管)，内径为2～5mm，由"**不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶

一.主要技术指标优异首先是如何看指标。液相色谱仪'>液相色谱仪的指标很多，有泵的、检测器的、色谱柱等等。我们认为要看主要技术指标，根据国家标准，仪器的主要指标有噪音，漂移，*小检测浓度，定性定量重复性等。这些指标都要放在系统，回路里去看，去比较。就是需要把各单元装置都要联接好，如接好色谱柱，进样阀，并且要通上流动相。因为您在分析中也都是联接好以后才可以进行分析的，而不是单单用个检测器或是泵的。然后在这个基础上，我们再去比较这些主要指标。1.噪音是指由仪器的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度，噪音越大，检测的灵敏度就越低。对于检测低含量的样品就要求仪器的噪音越小越好，否则噪音过大将会导致基线不稳，甚至影响分析结果。2.*小检测浓度(*小检测限)是反映仪器灵敏度的重要参数。CL=2×Nd×C/H(CL：*小检测浓度Nd:噪音C：样品浓度*小检测浓度H：样品峰高)由上式可见，*小检测浓度是和噪音成正比的，噪音越大，*小检测浓度就越大，灵敏度就越低。某些厂家回避了这个指标，说明他们不

日常维护:泵泵是液相色谱仪'>液相色谱仪的心脏，须精心维护和保养。处于良好工作状态的泵，其基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而平稳。要使泵具备良好的操作性能，应该保持泵系统的清洁。具体做法如下：(1)要选择**的容剂和试剂，在进入仪器前用0。45um膜过滤，并进行脱气处理。(2)泵开始使用时，一定要用合适的流动相彻底清洗干净。(3)定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈，并经常清洗进液处的微孔滤头。(4)改变流动相时，应避免沉淀产生，以防止泵堵塞。1.2色谱柱色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱应具有很高的塔板数，且仪器基线平稳。色谱柱比较娇气，在平时的工作中须注意以下事项：(1)色谱柱不能够碰撞、弯曲或强烈震荡;安装时，一定要保证阀件或管路的清洁。(2)流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相。(3)在满足灵敏度的情况下，尽可能使用小进样量。如果样品比较“脏”，要进行净化或提纯处理。(4)分析结束语后，要清洗掉进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱。(5)如色谱柱长期不用，应该用适当的有机溶剂保存并封闭

1、流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器'>过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法**不断产生的气泡。原因剖析：过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。故障处理：过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0～3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。2、柱压高原因剖析：(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;(2)样品污染沉积。故障处理：对于**种情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅

1、色谱柱中的流动相是否会会排干的问题：不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。2、色谱柱变干的问题：另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干涸的情况不太容易发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂（如经氦气脱气的甲醇）冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要（以1mL/min的流速）冲一个小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。3、使用PEEK（polyetheretherketone）管路和接头需要注意以下问题

1.HPLC的日常操作条件：温度：10—30℃;相对湿度<80%;*好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。2.泵的保养：1)使用流动相尽量要清洁;2)进液处的沙芯过滤头要经常清洗;3)流动相交换时要防止沉淀;4)避免泵内堵塞或有气泡;3.进样器的保养：1)每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染;4.柱的保养：1)柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动;2)当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净;3)要注意流动相的脱气;4)避免使用高粘度的溶剂作为流动相;5)进样样品要提纯;6)严格控制进样量;7)每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品;8)每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱;9)若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭;5.检测器(UV)的保养：1)紫外灯的保养：在分析前、柱平衡得差不多时，打开检测器;在分析完成后，马上关闭检测器。2)样品池要保养。

高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送(*高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。特点1.高压：液相色谱法以液体为流动相(称为载液)，液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～350×105Pa。2.高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h。3.高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外，用样量小，一般几个微升。5.适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气

·环境要求：1、推荐实验室温度为20～27℃，温度变化<3℃/hr，相对湿度<80%2、推荐液相色谱仪'>液相色谱仪工作台，长2米、宽0.8米，承重大于80公斤。建议离墙距离0.3米以上。·电源要求：1、单相交流220V，(+5%～-10%)，50～60Hz，有单独的良好接地。2、若电压不稳，需配置稳压电源，功率大于2.5千瓦。3、准备1个合格的万用接线板，总数不小于5个扁平三角接线插座。·溶剂要求：1、二次重蒸馏水，1000毫升以上(建议用0.45微米水相滤膜过滤)。2、乙腈或甲醇(色谱纯或优级纯)，1500毫升以上(建议用0.45微米有机相滤膜过滤)。