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产品资料

H9人类胚胎干细胞培养体系

H9人类胚胎干细胞培养体系
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  • 产品名称:H9人类胚胎干细胞培养体系
  • 产品型号:BH-X019930
  • 产品展商:博湖
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简单介绍
收到H9人类胚胎干细胞培养体系后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
产品描述

培养方法

传代方法 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;

生长条件 37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。

存储条件 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

产品名称

规格

货号

H9人类胚胎干细胞培养体系

500ml

BH-X019930

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,货期短,价格优,公司产品仅用于科研售后齐全。

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 

3.在距���紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。 


细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Subunit : AMPK is a heterotrimer of an alpha catalytic subunit (PRKAA1 or PRKAA2), a beta (PRKAB1 or PRKAB2) and a gamma non-catalytic subunits (PRKAG1, PRKAG2 or PRKAG3). Interacts with FNIP1 and FNIP2.

Tissue Specificity : Highly expressed in kidney, heart, white adipose tissue, lung and spleen.

Post-translational modifications : Phosphorylated when associated with the catalytic subunit (PRKAA1 or PRKAA2). Phosphorylated by ULK1; leading to negatively regulate AMPK activity and suggesting the existence of a regulatory feedback loop between ULK1 and AMPK.

Similarity : Belongs to the 5'-AMP-activated protein kinase beta subunit family.

Database links :

Entrez Gene: 5564 Human

Entrez Gene: 19079 Mouse

Entrez Gene: 83803 Rat

Omim: 602740 Human

SwissProt: Q9Y478 Human

SwissProt: Q9R078 Mouse

SwissProt: P80386 Rat

Unigene: 6061 Human

Unigene: 726001 Human

Unigene: 458152 Mouse

Unigene: 3619 Rat

AMPKβ1(AMP-activated Protein Kinase beta-1)(腺苷单磷酸活化蛋白激酶β-1)是一种参与细胞适应能量危机的应激反应酶,AMPK不仅可以在细胞水平作为能量的感受器,还可以通过和细胞因子,如瘦素、脂联素和ghrelin来参与调节机体的能量消耗和能量摄入.

英文名称  Anti-phosphos-PCNA (Tyr211)
H9人类胚胎干细胞培养体系抗凝血因子3检测试剂盒三异 95%3-(2-呋喃基)烯 99%

趋化因子C-C-基元配体2检测试剂盒(±)-樟脑(合成) 96%甲基糠基二硫 98%

趋化因子C-C-基元配体4检测试剂盒AR,99.5%反,反-2,4-庚二烯 90%

肾酶检测试剂盒CP,99.5%三硫酮 ≥99%, FG

抗原215检测试剂盒GR,99.8%4-羟基-3-甲氧基苯甲 98%

亮氨酸氨肽酶3检测试剂盒PT,99.8%六氯酮 99%

可溶性CD44分子检测试剂盒光谱级2-异基-4-甲基噻唑 98%

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 

2.所使用的盖玻片应该为玻璃**,并经过铬酸洗液处理; 

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

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